[发明专利]生物分子表面展示及其用途

说明书

本申请是申请日为2006年5月5日、发明名称为“生物分子表面展示及其用途”的中国发明专利申请第200680054933.2号的分案申请。

技术领域

本发明通常涉及生物分子表面展示系统，以及展示作为疫苗的膜糖蛋白的特定应用。具体而言，本发明涉及治疗和/或预防禽流感的方法、疫苗、免疫组合物和试剂盒，以及涉及调节对禽流感病毒的免疫应答的相关方法。更具体而言，本发明涉及用于治疗和/或预防毒株H5N1禽流感病毒的方法、疫苗、免疫组合物和试剂盒，以及涉及用于调节对毒株H5N1禽流感病毒的免疫应答的方法。

背景技术

禽流感病毒是重大的世界性的鸟类传染病，其是由流感病毒的A型毒株引起的。所有鸟类被认为容易感染该疾病，这可产生从轻微发病到高度接触传染范围内的症状以及迅速致命的发病机理，导致严重的流行病。

已知15种流感病毒亚型传染鸟类，因此在鸟群内提供了广泛的流感病毒贮存宿主。具体而言，因为候鸟对传染具有天生抵抗力，因此它们对传染其他鸟群，诸如特别容易感染迅速致命流感流行病的家禽，提供了有力的载体。高致病形式的所有爆发都是由亚型H5和H7的流感A病毒引起。

受染地区的检疫以及受染或暴露群体的毁灭是针对防止禽流感病毒传播的标准程序。然而，此类措施不仅受阻于高接触传染性、易于传播性以及病毒在其天然宿主体外的长期稳定性，而且就实施此类措施以及对鸟类的毁灭而言，它们还导致巨大的经济代价。

1997年在香港，禽流感病毒的H5N1毒株从鸟类直接转移到人，在18个人身上引发严重的呼吸系统疾病，其中6人死亡。此次传染与由相同毒株引起的禽流感病毒的香港家禽种群流行病同时爆发。2003年的另一次爆发引发2例并且1人死亡。人类感染禽流感病毒的进一步病例已经在几个国家观察到，包括荷兰、越南和中国。另外，鸟类感染H5N1毒株的最近爆发已经在东欧特别是土耳其进行了报道。

H5N1受到特别关注，原因在于其迅速突变并擅长从感染其他动物种类的病毒捕获基因。另外，来自H5N1的分离株具有高致病性并且能够在人身上引发严重的疾病。从感染中幸存的鸟类经口以及通过粪便排泄病毒至少10天，从而促进了活家禽市场上以及通过候鸟的进一步传播。

有关人感染H5N1禽流感病毒的临床进展的数据非常有限，并且抗病毒药——其中仅有一些可以被用于治疗和预防——也具有局限性。

本发明基于生物分子表面展示系统的开发，以及此类系统展示作为疫苗的膜糖蛋白的特定应用。具体而言，本发明涉及治疗和/或预防禽流感的方法、疫苗、免疫组合物和试剂盒，以及涉及用于调节对禽流感病毒的免疫应答的相关方法。

发明内容

根据本发明的第一方面，提供用于呈递或展示多肽的方法，其中所述方法包括：

(a)将编码所述多肽的核酸插入杆状病毒表达载体中，其中所述杆状病毒表达载体包括来自白斑综合症病毒的iel启动子；

(b)用所述表达载体转染至少一种宿主细胞；和

(c)从所述表达载体中表达所述多肽，其中所述多肽被呈递或展示在杆状病毒的表面膜上。

根据本发明的第二方面，提供用于呈递或展示多肽的系统，其中所述系统包括：

(a)编码所述多肽的核酸，其被插入杆状病毒表达载体中，其中所述杆状病毒表达载体包括来自白斑综合症病毒的iel启动子；

(b)用于用所述表达载体转染至少一种宿主细胞的装置；和

(c)用于从所述表达载体表达所述多肽的装置，其中所述多肽被呈递或展示在杆状病毒的表面膜上。

根据本发明的第三方面，提供用于治疗或预防受治疗者疾病的疫苗，其中所述疾病与禽流感病毒有关，并且其中所述疫苗包括含有编码血凝素肽的核酸的表达载体，使得在使用时所述血凝素肽通过所述表达载体在所述受治疗者中表达。

受治疗者可以是人、禽或猪。

禽流感病毒可以是禽流感病毒的H5N1亚型。

表达载体可以包括杆状病毒表达载体。所述杆状病毒表达载体可以是含有水泡性口膜炎病毒糖蛋白的假性病毒载体。

表达载体可以进一步包括启动子。所述启动子可以包括来自白斑综合症病毒的iel启动子。该启动子可以可操作连接至编码抗原肽的核酸。

血凝素肽可以包括来源于禽流感病毒的H5N1亚型的氨基酸序列。

根据本发明的第四方面，提供用于治疗或预防受治疗者疾病的疫苗，其中所述疾病与禽流感病毒相关，并且其中所述疫苗包括表达载体，其包含：

(a)编码血凝素肽的核酸；和