[发明专利]一种别隐品碱的制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于中药有效部位的提取分离技术领域，具体地说，涉及一种从夏天无中提取制备别隐品碱的方法。

背景技术：

别隐品碱(Allocryptopine)，分子式：C₂₁H₂₃NO₅，分子量：369.40，是从罂粟科植物(如博落回、血水草、白屈菜、夏天无等)中分离得到的一种叔胺生物碱，无色，溶于乙醇、氯仿、乙醚、乙酸乙酯及稀酸，mp.160-161℃。别隐品碱结构母核中具有与许多抗心律失常中药成分相似的异喹啉结构，刘谟焓通过实验证明其具有多种抗实验性心律失常的作用。别隐品碱抵抗由乌头碱诱发的交感神经系统发放加强，进而促进内源性儿茶酚胺释放，使细胞膜钙离子内流增加所产生的心律失常；别隐品碱还可以抑制动作电位时程和有效不应期缩短，最终抑制折返的形成，而具有抗心律失常的作用；文毅等通过实验表明，别隐品碱通过对瞬间外向钾电流的阻滞作用使心肌细胞内钙离子浓度减少，钾离子增加，心室自律性降低，并抑制振荡性后电位致异位节律，并且可抑制氧自由基的产生，从而具有抗心律失常的作用。另外，别隐品碱对乌头碱引起的动物心律失常其抑制功效大于烟胺；能阻止乌头碱引起的动物心肌缺钾；静脉注射10mg/kg时，能阻止电刺激引起的动物心房纤维颤动。

夏天无为罂粟科植物伏生紫堇Corydalis decumbens(Thunb.)Pers.的干燥根茎，收载于2010版中国药典一部，具活血止痛、舒筋活络、祛风除湿之功效，为中医治疗中风偏瘫、头痛、跌扑损伤、风湿痹痛、腰腿疼痛的常用药物，主要含有生物碱类成分。夏天无的总生物碱具有拮抗β受体和抗心律失常作用。

中国专利申请号03118201.1使用大孔树脂分离得到血根碱和白屈菜红碱，但涉及的别隐品碱是与原阿片碱的混合物，未分离纯化得到别隐品碱单体成分。胡之壁等通过硅胶柱分离血根碱等生物碱单体，但只适合实验室少量制备，不适合产业化生产。经检索，在国内仅有一件专利涉及别隐品碱单体的工业生产方法，即中国专利申请号200810031701.6，该方法采用乙醇提取，初始提取物再在酸醇中沉淀出大部分生物碱，用稀碱液调整滤液pH，过滤后再调pH，重新过滤，滤渣即为粗提物，粗提物先后用乙酸乙酯、甲醇回流处理，减压蒸干后在甲醇或氯仿-甲醇或无水乙醇中重结晶，得到别隐品碱单体，该方法反复使用酸碱，甚至使用浓硫酸，且有机溶剂用量大、产品杂质含量高。李发旺等以博落回为原料，采用酸水浸提，提取出总生物碱的粗提物，再用阳离子交换树脂吸附总碱，然后在索氏提取器中，用混合有机溶剂提取吸附了总碱的树脂，在氮气保护下，利用柱层析方法，分离、纯化总碱，最后获得四种生物碱，通过波谱分析与表征，证实四种生物碱分别为：别隐品碱，原阿片碱，血根碱，白屈菜红碱。该方法有机溶剂用量大、分离得到的别隐品碱杂质多。

发明内容：

本发明针对罂粟科植物提取别隐品碱时，酸碱使用频繁、有机溶剂用量大、杂质含量高等问题，采用大孔树脂制备别隐品碱，具体内容如下：

一种别隐品碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

A.酸水提取：以富含别隐品碱的罂粟科植物为原料，粉碎成粗粉，用质量比体积含量为0.2-1.0％的稀酸水溶液浸泡8-24小时，渗漉提取，渗漉流速为4-6ml/min·kg；

B.大孔树脂富集：提取液调pH至7.5-8.5，过大孔吸附树脂柱，先以水洗，再用20-45％乙醇洗脱，浓缩洗脱液；

C.溶剂萃取：采用1-1.5倍浓缩液体积的二氯甲烷或氯仿萃取，萃取3-5次，合并萃取液，浓缩得浸膏；

D.色谱柱层析：用氧化铝或硅胶作为柱填料，粒度为100-300目，乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱，分段收集流分；

E.结晶：用混合溶剂结晶，得到纯度达95％以上的别隐品碱产品。

本发明所采用的富含别隐品碱的罂粟科植物可选夏天无、博落回、血水草等。

步骤A所述酸水为盐酸或硫酸。

步骤B所述大孔吸附树脂可选DA201、DM301、DS401型大孔吸附树脂。

步骤E所述混合溶剂为石油醚-甲醇或乙酸乙酯-乙醇混合溶剂，按体积比，由高到低，依次按50∶1、20∶1、10∶1、5∶1和1∶1，分段收集流分。

本发明采用大孔树脂和氧化铝应用于别隐品碱的制备，大大缩短了提取制备时间、去除了杂质，避免酸碱反复使用，尤其是浓酸浓碱的使用，具有简便快速、易于洗脱和再生、产品纯度高等优点，适于夏天无等药材中别隐品碱的大量制备。