[发明专利]从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法

权利要求书

1.一种从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于它包括以下步骤：(a)将动物血用离心机分离为血浆和红血球；(b)对红血球进行热变性处理；(c)超滤浓缩；(d)沉淀处理；(e)层析；(f)冷冻干燥。

2.如权利要求1所述的从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于所述的离心机为碟式分离机。

3.如权利要求1所述的从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于所述的热变性处理为：将收集的红细胞每100升加入3～5公斤氯化钠，30～50克氯化铜，蒸馏水90～110升搅匀，水浴加热到68-70℃恒温25～35分钟，将反应液泵入冷却罐，搅拌机搅拌，迅速冷却至室温，搅拌1～3小时，甩干机甩干过滤去除变性血红蛋白，得滤液1；将滤液1在60～70℃恒温水浴下，向滤液中慢慢加入30～50克氯化铜，至滤液清澈变为淡蓝色为止，保温15～25分钟，将反应液泵入冷却罐，搅拌机搅拌，迅速冷却至室温，搅拌1～3小时，甩干机甩干过滤去除变性血红蛋白，得滤液2。

4.如权利要求1所述的从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于所述的超滤浓缩为：将滤液2经布氏漏斗抽滤去除细微颗粒，经中空纤维超滤器超滤浓缩至总体积的1/20～3/20，收集浓缩液，中空纤维超滤器的截留分子量选为5～15千道尔顿。

5.如权利要求1所述的从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于所述的沉淀处理为：在浓缩液中，不断搅拌下缓慢加入预冷的0.6～0.8倍全体积的工业丙酮，3～5℃放置0.5～1.5小时，产生大量絮状沉淀，3000～3500转/分冷冻离心25～35分钟，沉淀留用；将上清液回收再次不断搅拌下缓慢加入预冷的0.5～0.75倍全体积的工业丙酮，3.5～4℃放置1～1.5小时，3000～3500转/分冷冻离心25～35分钟，将两次沉淀合并，加入少量去离子水，充分搅匀，装入透析袋透析11～13小时，3000～3500转/分冷冻离心25～35分钟，离心除去不溶性蛋白，得透析液。

6.如权利要求1所述的从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于所述的层析为：空纤维离子交换柱预先用2～32.5毫摩尔/升的磷酸钾缓冲液酸碱度值7.8平衡，透析液上在层析柱上，完毕后用同一缓冲液洗脱至280纳米下的吸收率低于0.02，然后用2.5～2002.5毫摩尔/升的酸碱度7.8磷酸缓冲液进行梯度洗脱，用部分收集器收集，在洗脱过程中，亦可通过肉眼观察收集淡蓝色蛋白粉区带，测定收集液中的酶活力符合酶纯化标准的收集管，混合其收集液。

7.如权利要求1所述的从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于所述的冷冻干燥为：收集液经去离子水透析11～13小时，冷冻干燥。