[发明专利]一株Kefir源植物乳杆菌MA2发酵剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一株Kefir源植物乳杆菌Lactobacillus plantarum MA2发酵剂的喷雾干燥制备方法。

背景技术

目前，乳酸菌发酵剂制备技术主要依靠真空冷冻干燥方法，通过超低温真空条件使菌体脱水休眠，达到持久保藏的效果，但是由于真空冷冻干燥需要的时间长、产量小、成本高，使得产品成本升高，急需寻找大规模的生产方法。

传统的喷雾干燥法制备发酵剂具有快速、低成本的特点。但是由于温度、进料流速、保护剂组成和添加量都对发酵剂保藏期和活力有较大影响，使喷干发酵剂的活性、功能性、保藏期都远远落后于冻干发酵剂。

发明内容

本发明的目的是在于提供一种植物乳杆菌喷雾干燥制备方法，克服现有技术的不足之处，提供一种快速、低成本，并且产品具有较高活性和较长保藏期的发酵剂制备方法。

本发明实现目的的技术方案是：

Kefir源植物乳杆菌MA2的喷雾干燥制备方法，步骤如下：

1、选择实验菌株，活化菌株。

2、对活化后菌株进行液体培养，收集菌体，加入保护剂。

3、对添加有保护剂的菌体进行喷雾干燥，并测定产品活菌数和凝乳时间，并对产品的保藏期进行跟踪测量。

而且，所述保护剂的配方是：谷氨酸钠2％，海藻糖5％，乳糖5％，脱脂奶10％。

而且，所述加入保护剂与菌泥的比例为：3～5∶1。

而且，所述喷雾干燥的喷干的条件为：进风温度150±5℃，进料流速60±5mL/h。

而且，所述Kefir源植物乳杆菌MA2的喷雾干燥制备方法，MA2发酵剂的活菌数不少于1×10⁹cfu/g。

而且，所述Kefir源植物乳杆菌MA2的喷雾干燥制备方法，保藏6个月后MA2发酵剂的活菌数不少于1.0×10⁹cfu/g。

具体实施方式

1、菌株的选择及培养基的制备

发酵菌株：肠膜明串珠菌，植物乳杆菌及干酪乳杆菌。

培养基：10％脱脂奶培养基，于115℃下灭菌20min；改良MRS培养基，固体培养基另添加2％琼脂，于121℃下灭菌20min。

2、喷干样品的制备过程

2.1MA2的活化

-80℃冰箱取菌样无菌条件下接到2mL MRS培养基，37℃厌氧培养12h。按4％接菌量接到8mL 12％奶管中活化，37℃厌氧培养箱培养至凝乳，从培养箱取出后于4℃冰箱低温冷藏保存，此步骤重复3次可使菌种得到活化。

2.2液体培养，收集菌体

活化好的菌种，按3％接菌量接入到1L MRS液体培养基中，37℃，培养24小时后，在4500r/min、4℃离心15min，弃上清收集菌体。

2.3添加保护剂

将保护剂与收集的菌体按(体积质量比)3～5∶1的比例混匀，保护剂组成为：谷氨酸钠2％，海藻糖5％，乳糖5％，脱脂奶10％。

3、喷雾干燥

将喷干样品在进风温度150±5℃，进料流速60±5mL/h。条件下进行喷雾干燥。测定喷干菌粉的活菌数及凝乳时间，将产品于4℃冰箱冷藏，跟踪测定不同保藏时间的活菌数及凝乳时间。