[发明专利]一种快速提取红松胚基因组DNA的方法无效

专利信息
申请号: 201110052751.4 申请日: 2011-03-04
公开(公告)号: CN102168082A 公开(公告)日: 2011-08-31
发明(设计)人: 隋心;韩士杰;冯富娟 申请(专利权)人: 中国科学院沈阳应用生态研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 代理人: 许宗富;周秀梅
地址: 110164 辽宁省*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 提取 红松 基因组 dna 方法
【权利要求书】:

1.一种快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:按如下方法操作,

1)将研磨后红松胚投加于氯仿中,于60-65℃水浴10-15min,待用;

2)将上述水浴处理后红松胚加入CTAB提取缓冲液中,于60-65℃水浴10-15min,而后以10000-12000r·min-1离心2-5min,取上清液待用;

3)将步骤2)所得上清液中加入与上清液等体积的氯仿-异戊醇,而后在10000-12000r·min-1离心2-5min,取上清液待用;

4)将步骤3)所得上清液中加入上清液2/3体积的异丙醇,混匀后于-20--40℃下静止5-10min,而后以10000-12000r·min-1离心1-5min,收集沉淀,洗涤后,即得到红松胚基因组DNA。

2.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤1)中研磨后红松胚为将红松胚加入液氮中研磨成粉末。

3.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤1)和2)中水浴时需振荡2-3次。

4.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤3)中氯仿-异戊醇混合比例为按体积比为24∶1混合。

5.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤4)中上清液与异丙醇混合后上下倒置混合均匀。

6.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤5)中离心得到沉淀用70%乙醇洗沉淀2次,而后于室温干燥,将干燥后所得DNA沉淀溶于50μLTE中溶解保存。

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