[发明专利]一种快速提取红松胚基因组DNA的方法无效
| 申请号: | 201110052751.4 | 申请日: | 2011-03-04 |
| 公开(公告)号: | CN102168082A | 公开(公告)日: | 2011-08-31 |
| 发明(设计)人: | 隋心;韩士杰;冯富娟 | 申请(专利权)人: | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 许宗富;周秀梅 |
| 地址: | 110164 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 快速 提取 红松 基因组 dna 方法 | ||
1.一种快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:按如下方法操作,
1)将研磨后红松胚投加于氯仿中,于60-65℃水浴10-15min,待用;
2)将上述水浴处理后红松胚加入CTAB提取缓冲液中,于60-65℃水浴10-15min,而后以10000-12000r·min-1离心2-5min,取上清液待用;
3)将步骤2)所得上清液中加入与上清液等体积的氯仿-异戊醇,而后在10000-12000r·min-1离心2-5min,取上清液待用;
4)将步骤3)所得上清液中加入上清液2/3体积的异丙醇,混匀后于-20--40℃下静止5-10min,而后以10000-12000r·min-1离心1-5min,收集沉淀,洗涤后,即得到红松胚基因组DNA。
2.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤1)中研磨后红松胚为将红松胚加入液氮中研磨成粉末。
3.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤1)和2)中水浴时需振荡2-3次。
4.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤3)中氯仿-异戊醇混合比例为按体积比为24∶1混合。
5.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤4)中上清液与异丙醇混合后上下倒置混合均匀。
6.按权利要求1所述的快速提取红松胚基因组DNA的方法,其特征在于:所述步骤5)中离心得到沉淀用70%乙醇洗沉淀2次,而后于室温干燥,将干燥后所得DNA沉淀溶于50μLTE中溶解保存。
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