[发明专利]IL-1ra-Fcε融合基因及其编码的蛋白在治疗过敏性鼻炎方面的应用有效

申请号：	201110030837.7	申请日：	2011-01-28
公开（公告）号：	CN102145179A	公开（公告）日：	2011-08-10
发明（设计）人：	徐东刚;付文亮;王园园;邹民吉;刘中成	申请（专利权）人：	中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
主分类号：	A61K48/00	分类号：	A61K48/00;A61K39/395;A61P11/02;A61P37/08
代理公司：	北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246	代理人：	史双元
地址：	100850***	国省代码：	北京;11
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摘要：
搜索关键词：	il ra fc 融合基因及其编码蛋白治疗过敏性鼻炎方面应用
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【说明书】：

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及IL-1ra-Fcε融合基因及其编码的蛋白在治疗过敏性鼻炎方面的应用。

背景技术

鼻腔炎性细胞浸润以及血清中IgE浓度升高是过敏性鼻炎主要的指征。抑制IgE水平升高及抗炎治疗是过敏性鼻炎治疗的研究热点。研究证实，IL-1ra作为有效的抗炎因子，具有治疗和预防过敏性鼻炎的作用，但IL-1ra分子半衰期较短，在一定程度上限制了它的广泛应用。鼻炎发病过程中，IgE与其高亲和力受体的结合是触发肥大细胞、嗜碱性粒细胞脱颗粒，是导致发病的关键因素。阻断IgE与其高亲和力受体的结合是治疗过敏性鼻炎的有效靶点之一。

白细胞介素-1(IL-1)为体内作用较强的致炎症细胞因子之一，在过敏性鼻炎发生、发展过程中具有重要作用。IL-1ra作为天然的IL-1拮抗剂，它能在受体水平拮抗IL-1的作用。但由于IL-1ra在体内的半衰期极短，且需要大量的IL-1ra才能消除IL-1的作用，所以必须长期大剂量的应用才能达到治疗的效果，此点在IL-1ra治疗类风湿性关节炎中得到证实，长期的全身大剂量用药将产生强烈的不良作用。

IgE与其受体结合是诱发过敏性鼻炎的关键性因素，阻断IgE与其高亲和力受体的结合是治疗过敏性鼻炎的有效靶点之一，IgE分子恒定区Fc3-4具有与IgE高亲和力受体的结合的特点。本研究室利用基因工程技术将IL-1ra和IgE分子恒定区Fc3-4基因重组在一起，获得了可阻断IgE与其高亲和力受体结合，又可拮抗IL-1的生物学效应并延长IL-1ra的半衰期的具有双功能的融合蛋白分子。

本发明将IgE分子的Fc3-4区与IL-1ra构建成融合分子，利用该融合基因及其所编码的蛋白，以分别直接给药的方式治疗过敏性鼻炎。滴注的裸基因表达载体可以在鼻腔内表达，表达的重组蛋白不仅能拮抗IL-1的炎性作用，其中融合的Fc片段还可封闭IgE的受体，抑制肥大细胞、嗜碱性粒细胞脱颗粒，从而达到治疗过敏性鼻炎的目的；

利用纯化制备的重组IL-1ra-Fcε蛋白直接滴注也可获得同样的治疗效果。

发明内容

本发明的目的在于提供IL-1ra-Fcε融合基因在治疗过敏性鼻炎方面的应用。

本发明的目的还在于提供IL-1ra-Fcε融合基因编码的蛋白在治疗过敏性鼻炎方面的应用

IL-1ra-Fcε融合基因在治疗过敏性鼻炎方面的应用，其特征在于，将构建的融合基因表达载体与转染试剂配置成混悬液，直接滴入鼻腔，对过敏性鼻炎进行治疗，滴入周期为每天一次，连续滴鼻7天。

所述转染试剂为脂质体2000，用量为10～100μL/只大鼠；所述IL-1ra-Fcε融合基因载体的用量为10～100μg/只大鼠。

IL-1ra-Fcε融合蛋白在治疗过敏性鼻炎方面的应用，其特征在于，将纯化的IL-1ra-Fcε融合蛋白用PBS缓冲液稀释至0.1～5mg/ml，直接滴入鼻腔，治疗过敏性鼻炎，滴入周期为每天一次，连续滴鼻7天。

所述IL-1ra-Fcε融合蛋白的用量为0.2mg/只大鼠。

所述纯化的IL-1ra-Fcε融合蛋白为经过S300分子筛柱和S-sepharose阳离子层析柱纯化并逐步透析复性的蛋白^[2]。

PBS缓冲液成分为NaCl 1.37mol/L、KCl 27mmol/L、Na₂HPO₄100mmol/L、KH₂PO₄ 20mmol/L，pH为7.5。

本发明的有益效果：本发明的IL-1ra-Fcε融合基因编码的蛋白即能拮抗IL-1的炎性作用，还可抑制肥大细胞、嗜碱性粒细胞脱颗粒，从而达到治疗过敏性鼻炎的目的。可直接利用构建的IL-1ra-Fcε真核表达载体滴鼻治疗过敏性鼻炎；利用纯化的IL-1ra-Fcε融合蛋白直接滴鼻也可治疗过敏性鼻炎。

附图说明