[发明专利]一种呼出气采样盒和采样方法有效
申请号: | 201110020115.3 | 申请日: | 2011-01-18 |
公开(公告)号: | CN102175493A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 要茂盛;徐振强;朱彤 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | G01N1/22 | 分类号: | G01N1/22 |
代理公司: | 北京万象新悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11360 | 代理人: | 贾晓玲 |
地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 呼出 采样 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种简易、高效的呼出气采样盒和采样方法,主要应用于临床疾病检测、防范控制流感疫情等。
背景技术
2003年的SARS和2009年H1N1的大型流感的爆发造成了巨大的社会恐慌与经济损失。在流感爆发时通常采用体温初筛、然后隔离确诊等手段来防范流感的进一步扩散。可是,被流感病毒感染的病人有一定的潜伏期,虽然临床上没有症状,但也是病毒的携带者,极具感染性。呼出气冷凝液(Exhaled breath condensate简称EBC)越来越多地被用来诊断疾病,研究对象包括细胞因子,过氧化氢(H2O2),亚硝酸盐(nitrite)等。最近一项研究显示对于原发性乳腺癌的病人,呼出气中的过氧化氢明显偏高。此外,研究也发现在病人的呼出气里有普通甲型流感病毒,这样为通过检测呼出气中的生物成分来诊断感染人群提供了理论依据。
然而,常用的呼出气冷凝器,如RTube collection system(Respiratory Research,Inc,Charlottesville,VA)和EcoScreen condenser(Erich Jaeger GmbH,Würzburg,Germany)存在构造复杂、笨重、效率低、携带不便等缺陷,这些缺陷极大地限制了呼出气冷凝液在医学上的应用。
发明内容
本发明的目的:为克服目前传统的呼出气采样器笨重、庞大和重复利用率低等缺点,本发明提供了一种便携的简易呼出气采样盒以及采样方法。
本发明的技术方案如下:
方案1:一种呼出气采样盒,包括:采样盒底座,采样盒盖,所述采样盒盖上有一呼出气入口,其特征在于,采样盒底座上放置冰层,冰层之上放置一张超低温处理的超疏水膜。所述超低温为-70℃。
方案2:作为方案1的一种优选实现,其特征在于,所述采样盒盖和采样盒底座无缝接合。例如,可以使用螺扣或者卡扣等方式进行扣接。这样可以保证在采样过程中无水蒸气污染。
方案3:作为方案1的一种优选实现,其特征在于,所述采样盒的材料为聚四氟乙烯。可以减少呼出气在装置内部的吸附。
方案4:作为方案1的一种优选实现,其特征在于,所述采样盒形状为下部为长方体,上部为四棱台,所述采样盒底座的长宽高尺寸为100mm×50mm×30mm,采样盒盖上、下部的尺寸为50mm×50mm×25mm和100mm×50mm×25mm。
方案5:作为方案1或3或4的一种优选实现,其特征在于,所述采样盒盒壁的厚度为3mm。这样整个采样盒的尺寸很小,重量可以做到小于50g,非常便携。
本发明同时提供了利用方案1所述的采样器进行呼出气采样的方法,如下:
方案6:一种利用方案1所述的采样盒进行呼出气采样的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a)将一层无菌水加入到采样盒底座上;
b)将采样盒底座进行超低温处理,直至所述无菌水凝结为固态;
c)将合适大小的无菌的超低温(-70℃)处理后的超疏水膜放置于采样盒底座内的冰上;
d)将一根无菌导气管插入到呼出气入口中,使得导气管下端与超疏水膜保持一定间距;
e)呼出气的被采者将口放到导气管上,用鼻子吸气,再用嘴将呼出气吹到导气管中;
f)反复执行上一步,在达到指定次数或者指定时间后,停止采样;
g)在无菌环境下,将超疏水膜取出;
h)使用移液枪在超疏水膜表面滴加一定量不含有核酸的水,用移液枪的枪头拨动液珠,使其在超疏水膜表面上都能有接触并来回滚动;
i)将液珠用移液枪吸取并转移到无菌离心管中,收集到的液体即含有呼出气的成分,采样结束。
方案7:作为方案6的一种优选实现,其特征在于,所述步骤b)中,所述超低温处理为把采样盒底座置于超低温冰箱中保存。
方案8:作为方案6的一种优选实现,其特征在于,所述步骤b)中,导气管下端与超疏水膜的间距为2mm。注意,导气管下端一定不能与超疏水膜接触。
方案9:作为方案6的一种优选实现,其特征在于,所述步骤f)中,指定时间为5-10分钟。
方案10:作为方案6的一种优选实现,其特征在于,所述步骤h)中,所述不含有核酸的水的量为5-10μL。
本发明的有益效果:本发明提供的装置采用简单的超疏水膜和特制的微型采样盒实现对病人呼出气的快速、高效采样,总重小于50克。主要特点是:
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