[发明专利]在植物中导入并调节表达基因的方法和组合物

权利要求书

1.启动子构建体，其包含启动子，所述启动子后随有第一附着B(attB)位点，其中启动子选自：

a)包含核苷酸序列的启动子，该核苷酸序列具有SEQ ID NO：29中所显示序列；

b)包含核苷酸序列的启动子，该核苷酸序列与SEQ ID NO：29中所显示序列具有至少70％的序列同一性；和

c)包含SEQ ID NO：29中所显示序列的至少50个连续核苷酸的启动子；以及

其中所述第一attB位点具有SEQ ID NO：31中所显示的核苷酸序列。

2.权利要求1的启动子构建体，其中所述第一attB位点调节所述启动子的活性。

3.权利要求1或2的启动子构建体，其中所述启动子包含SEQ ID NO：29的291-430核苷酸中所显示的序列，或与SEQ ID NO：29的291-430核苷酸中所显示的序列具有至少70％序列同一性的序列。

4.权利要求1-3任意一项的启动子构建体，其中所述启动子构建体进一步包含将所述启动子与所述第一attB位点分开的连接序列。

5.权利要求4的启动子构建体，其中将所述启动子与所述第一attB位点分开的所述连接序列约133个核苷酸长。

6.权利要求4或5的启动子构建体，其中将所述启动子与所述第一attB位点分开的所述连接序列包含玉米rab175’未翻译区域(5’-UTR)的核苷酸。

7.权利要求6的启动子构建体，其中将所述启动子与所述第一attB位点分开的所述连接序列包含SEQ ID NO：35中所显示的核苷酸序列。

8.权利要求4的启动子构建体，其中将所述启动子与所述第一attB位点分开的所述连接序列具有SEQ ID NO：36中所显示的序列，或者与SEQ ID NO：36中所显示的序列有至少70％序列同一性的核苷酸序列。

9.表达框，其包含与目的多核苷酸可操作相连的权利要求1-8任意一项中的启动子构建体。

10.权利要求9的表达框，其中所述表达框进一步包括将所述第一attB位点与所述目的多核苷酸分开的连接序列。

11.权利要求10的表达框，其中将所述第一attB位点与所述目的多核苷酸分开的所述连接序列具有约25个或约61个核苷酸的长度。

12.权利要求10的表达框，其中将所述第一attB位点与所述目的多核苷酸分开的所述连接序列具有SEQ ID NO：37或123中所显示的序列，或者与SEQ ID NO：37或123中所显示的序列有至少70％序列同一性的核苷酸序列。

13.权利要求9-12任意一项的表达框，进一步包含第二位点特异性附着B(attB)位点，其中所述第一和第二attB位点位于目的多核苷酸两侧。

14.权利要求13的表达框，其中所述第一和第二attB位点不相同。

15.权利要求13或14的表达框，其中所述第二attB位点具有选自SEQ ID NO：32、33和34的核苷酸序列。

16.权利要求13-15任意一项的表达框，进一步包含将所述目的多核苷酸与所述第二attB位点分开的连接序列。

17.权利要求16的表达框，其中将所述目的多核苷酸与所述第二attB位点分开的所述连接序列为约8个或约16个核苷酸长。

18.权利要求16的表达框，其中将所述目的多核苷酸与所述第二attB位点分开的所述连接序列具有SEQ ID NO：39或124中所显示的序列，或者与SEQ ID NO：39或124中所显示的序列有至少70％序列同一性的核苷酸序列。

19.权利要求13-18任意一项的表达框，其中所述表达框进一步包含所述第二attB位点之后的终止序列。

20.权利要求19的表达框，其中所述终止序列包括来自马铃薯蛋白酶抑制剂(PinII)基因的终止区域。