[发明专利]抗微生物肽

说明书

本发明涉及新的抗微生物肽、这些抗微生物肽的衍生物以及含有上述这些肽的组合物。

目前，几个抗微生物肽或衍生物正在进行进一步的临床开发，主要是以表面给药的药物的形式(Andrès，E.，Dimarcq，J.-L.Cationic anti-microbial peptides：from innate immunity study to drug development.La revue de medicine interne(2004)，25，629-635)。然而，这些分子中仅少数被建议用于于产养殖，例如分离自南美白对虾(Penaeus vannamei)的对虾抗菌肽(penaeidins)。参见EP1000153。

其原因可以通过这些抗微生物肽(AMP)中的某些在盐存在时被抑制这一事实来解释，然而本发明的肽并非如此，因为其分离自深海蠕虫：庞贝城蠕虫(Alvinella pompejana)或庞贝虫(Pompeii worm)。

该虫是科学界公认的最耐热的生物之一。实际上，它能忍耐从10℃至80℃的温度，这提示来自于该虫的分子例如本发明所述的肽，是热稳定的，并因此是药理学上感兴趣的。

通过大量使用抗生素而使水产养殖的产量增加已经成为可能。尽管存在法律约束，但预防性地使用抗生素很普遍，特别是在重要时期(例如，生命的早期、变态期、动物迁移期)，在动物生长期也使用。大量使用抗生素会促进抗生素抗性株系的突生进化，从而使动物养殖遭到破坏。多重抗生素抗性(MAR)株系出现在80年代中期。最近三十年几乎没有发现任何新的抗生素家族，并且只提供极少的针对抗性株系的新产品。

可选择的解决方案之一将是使用AMP。这些由动植物天然产生的分子具有广谱的和持久的抗革兰氏阴性和阳性细菌、抗真菌以及抗包膜病毒的活性。此外，这些AMP不是免疫原性的，它们对细菌菌膜的作用不会有助于抗生素抗性株系的突生进化。开发于90年代的第一个AMP是爪蟾抗菌肽(Magainin)的衍生物：来自于Magainin Pharmaceuticals公司的培昔加南(Pexiganan)。在III期研究中，培昔加南被包含在霜剂中，其显示出与治疗糖尿病期间超感染的皮肤溃疡的口服抗生素氧氟沙星相同的治疗效果。目前开发的在不久的将来可能会用于临床的其它AMP中，应该提及的是Intrabiotics Pharmaceuticals公司开发的Iseganan、Micro logix Biotech公司开发的MBI肽和Periondotix公司开发的Histatin的衍生肽(Andres等，之前引用的)。但上文所述的对虾抗菌肽与本发明分离自庞贝城蠕虫的要求保护的肽相比似乎具有更大的分子量。

通过用本发明的肽替换一部分使用中的抗生素将减少水产养殖中抗生素的使用。由于AMP的无害性，它们的使用将有利于树立良好的品牌形象，也有利于被处理的动物、顾客和环境的健康，还不必担心促进抗生素抗性株系的突生进化。

因此，本发明的一个目的是提供具有广谱抗微生素活性的新的AMP。

本发明涉及包含或由SEQ ID NO：1组成的新肽，条件是所述肽不是由序列SEQ ID NO：2至5组成的那些。

术语“肽”的含义是指连续的氨基酸链。如果其含有至少50个氨基酸则该连续的氨基酸链可被称为蛋白质。该连续的氨基酸链可以是天然来源的或人工的(来自化学合成)。

术语“连续的氨基酸链”的含义是氨基酸的接触或连接贯穿于不间断序列。

因为SEQ ID NO：1来自于庞贝城蠕虫，因此称之为Alvinellacine。Alvinellacine是具有抗微生物活性的最小序列。该肽含有参与形成胱氨酸桥的4个半胱氨酸。

词语“微生物”的含义是指用显微镜才能看见的生物，如细菌、真菌和病毒。

本发明还涉及由SEQ ID NO：6组成的肽，或者SEQ ID NO：1的衍生物：

-通过在其C端和/或N端修饰，和/或

-通过在其肽链中置换和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸，和/或

-通过修饰其肽链中的至少一个-CO-NH-肽键，特别是通过引入反(retro)或反-倒(retro-inverso)型键，和/或

-通过用非蛋白形成性氨基酸置换其肽链中的至少一个氨基酸，

特别是那些具有80％以上，优选85％以上，优选90％以上，更优选95％以上同源性的肽或肽的片段。