[发明专利]改善的拟肽大环化合物

权利要求书

1.一种制备具有优化的蛋白酶稳定性的多肽的方法，该方法包括：

(a)提供包含连接所述多肽的第一氨基酸与第二氨基酸的交联连接体的母体多肽；

(b)在所述多肽内鉴别包含蛋白酶切割位点的第一基序；

(c)将第一基序替换为包含至少一个α，α-二取代的氨基酸的第二基序，从而产生修饰的多肽；

(d)测定所述修饰的多肽的蛋白水解稳定性；和

(e)如果该修饰的多肽具有比母体多肽更高的蛋白水解稳定性，则选择该修饰的多肽作为具有优化的蛋白酶稳定性的多肽。

2.一种制备具有优化的蛋白酶稳定性的多肽的方法，该方法包括：

(a)提供包含连接所述多肽的第一氨基酸与第二氨基酸的第一交联连接体的母体多肽；

(b)在所述多肽内鉴别包含蛋白酶切割位点的第一基序；

(c)将第一基序替换为包含第三氨基酸的第二基序，其中该第三氨基酸通过第二交联连接体连接到所述多肽内的另一氨基酸上，从而产生修饰的多肽；

(d)测定所述修饰的多肽的蛋白水解稳定性；和

(e)如果该修饰的多肽具有比母体多肽更高的蛋白水解稳定性，则选择该修饰的多肽作为具有优化的蛋白酶稳定性的多肽。

3.权利要求1或2的方法，其中在由连接所述第一和第二氨基酸的交联连接体跨越的序列之外鉴别到所述第一基序。

4.权利要求1或2的方法，其中所述母体多肽包含螺旋。

5.权利要求1或2的方法，其中所述母体多肽包含α-螺旋。

6.权利要求1或2的方法，其中所述母体多肽的交联连接体连接所述第一氨基酸和所述第二氨基酸的α-碳(或侧链)。

7.权利要求1或2的方法，其中所述交联连接体连接间隔三个氨基酸的第一氨基酸和第二氨基酸。

8.权利要求1或2的方法，其中所述交联连接体连接间隔六个氨基酸的第一氨基酸和第二氨基酸。

9.权利要求1或2的方法，其中所述交联连接体跨越α-螺旋的1圈至5圈。

10.权利要求1或2的方法，其中所述母体多肽在pH 7.4时带净中性或净正电荷。

11.权利要求1或2的方法，其中通过所述交联连接体连接的所述第一和第二氨基酸中的至少一个是α，α-二取代的氨基酸。

12.权利要求1或2的方法，其中通过所述交联连接体连接的所述第一和第二氨基酸都是α，α-二取代的。

13.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶是细胞内蛋白酶。

14.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶是细胞外蛋白酶。

15.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶存在于脊椎动物的血液中。

16.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶存在于脊椎动物的口或消化道中。

17.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶存在于脊椎动物的肺中。

18.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶存在于脊椎动物的鼻窦中。

19.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶存在于脊椎动物的皮肤中。

20.权利要求1或2的方法，其中所述蛋白酶存在于脊椎动物的眼中。

21.权利要求1或2的方法，其中所述母体多肽提供治疗效果。

22.权利要求1或2的方法，其中所述母体多肽结合细胞内靶标。

23.权利要求2的方法，其中所述第三氨基酸通过所述第二交联连接体连接到所述第一或第二氨基酸上。

24.根据前述权利要求中任一项的方法制备的修饰的多肽。

25.权利要求24的修饰的多肽，其中所述修饰的多肽的蛋白酶稳定性至少5倍于对应的母体多肽。

26.一种治疗或控制与异常BCL-2家族成员表达或活性相关的疾病的方法，包括对需要的受试者施用有效量的根据前述权利要求中任一项所述的多肽。