[发明专利]具有木聚糖酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸有效
申请号: | 201080050237.0 | 申请日: | 2010-11-05 |
公开(公告)号: | CN102639697A | 公开(公告)日: | 2012-08-15 |
发明(设计)人: | E.弗拉森科;B.麦克布雷尔;D.斯科夫伦德;S.兰德维克 | 申请(专利权)人: | 诺维信股份有限公司;诺维信公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 史悦 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 聚糖 活性 多肽 编码 多核苷酸 | ||
1.一种具有木聚糖酶活性的分离的多肽,其选自下组:
(a)多肽,其包含氨基酸序列,所述氨基酸序列与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少65%同一性;
(b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在至少中等严格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,(ii)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链;
(c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸包含核苷酸序列,所述核苷酸序列与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少65%同一性;和
(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的变体。
2.权利要求1的多肽,其包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其具有木聚糖酶活性的片段,或其由SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其具有木聚糖酶活性的片段组成。
3.权利要求1的多肽,其由包含于大肠杆菌NRRL B-50309中的质粒pTF12Xyl170所包含的多核苷酸编码。
4.一种分离的多核苷酸,其包含编码权利要求1-3任一项的多肽的核苷酸序列。
5.一种产生权利要求1-3任一项的多肽的方法,包括:(a)在有助于所述多肽产生的条件下,培养以其野生型形式产生所述多肽的细胞;和(b)回收所述多肽。
6.一种产生权利要求1-3任一项的多肽的方法,包括:(a)在有助于所述多肽产生的条件下,培养包含核酸构建体的宿主细胞,所述核酸构建体包含编码所述多肽的核苷酸序列;和(b)回收所述多肽。
7.一种产生亲本细胞的突变体的方法,包括破坏或缺失编码权利要求1-3任一项所述多肽或其部分的多核苷酸,其导致所述突变体与亲本细胞相比较产生较少的所述多肽。
8.一种产生权利要求1-3任一项的多肽的方法,包括:(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养转基因植物或植物细胞,所述植物或植物细胞包含编码所述多肽的多核苷酸;和(b)回收所述多肽。
9.一种转基因植物、植物部分或植物细胞,其用编码权利要求1-3任一项的多肽的多核苷酸转化。
10.一种双链抑制性RNA(dsRNA)分子,包含权利要求9的多核苷酸的亚序列,其中任选地所述dsRNA是siRNA或miRNA分子。
11.一种在细胞中抑制具有木聚糖酶活性的多肽的表达的方法,包括向细胞施用或在细胞中表达权利要求10的双链抑制性RNA(dsRNA)分子。
12.一种分离的多核苷酸,其编码信号肽,所述信号肽包含SEQ ID NO:2的氨基酸1至19,或由SEQ ID NO:2的氨基酸1至19组成。
13.一种产生蛋白的方法,包括:(a)在有助于产生所述蛋白的条件下培养重组宿主细胞,所述细胞包含编码蛋白的基因,所述基因可操作地连接于权利要求12的多核苷酸,其中所述基因对于所述多核苷酸是外源的;和(b)回收所述蛋白。
14.一种降解或转化纤维素材料或含木聚糖材料的方法,包括在权利要求1-3任一项的多肽的存在下用酶组合物处理所述纤维素材料或含木聚糖材料。
15.权利要求14的方法,进一步包括回收降解的纤维素材料或含木聚糖材料。
16.一种产生发酵产物的方法,包括:
(a)在权利要求1-3任一项的多肽的存在下用酶组合物糖化纤维素材料或含木聚糖材料;
(b)用一种或多种(几种)发酵微生物发酵经糖化的纤维素材料或含木聚糖材料以产生发酵产物;和
(c)从所述发酵回收所述发酵产物。
17.一种发酵纤维素材料或含木聚糖材料的方法,包括用一种或多种(几种)发酵微生物发酵纤维素材料或含木聚糖材料,其中所述纤维素材料或含木聚糖材料是在权利要求1-3任一项的多肽存在下用酶组合物糖化的。
18.权利要求17的方法,其中所述纤维素材料或含木聚糖材料的发酵产生发酵产物。
19.权利要求18的方法,进一步包括从所述发酵回收所述发酵产物。
20.权利要求18或19的方法,其中所述发酵产物是醇、有机酸、酮、氨基酸或气体。
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