[发明专利]在连续细胞培养中产生所关心多肽或病毒的方法有效
| 申请号： | 201080036754.2 | 申请日： | 2010-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN102549142A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | L·格里尔伯格;M·赖特尔;D·弗莱施汉德尔 | 申请（专利权）人： | 巴克斯特保健股份有限公司;巴克斯特国际公司 |
| 主分类号： | C12M3/00 | 分类号： | C12M3/00;C12N5/00 |
| 代理公司： | 上海市华诚律师事务所 31210 | 代理人： | 傅强国;贾师英 |
| 地址： | 瑞士奥*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 连续 细胞培养 产生 关心 多肽 病毒 方法 | ||
1.一种用于在连续细胞培养中产生所关心多肽和/或病毒的方法，所述方法包含
(a)在连续细胞培养系统中培养表达所述所关心多肽和/或病毒的哺乳动物细胞，其中所述细胞培养系统包含细胞截留装置并且具有小于2d-1的稀释率(D)和小于2X107细胞/mL的细胞密度；和
(b)从自所述细胞培养系统除去的培养基中回收所述所关心多肽和/或病毒。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞截留装置产生小于90％的细胞截留率。
3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述稀释率在0.1d-1与1.0d-1之间。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞密度小于1X107细胞/mL。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞培养系统的稀释率和比生长率的比率(D/μ)在1.2与5之间。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞培养系统的比生长率在0.2d-1与0.8d-1之间。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞在所述细胞培养系统中培养大于20天。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞在所述细胞培养系统中培养大于40天。
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞在所述细胞培养系统中培养大于50天。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述稀释率和所述细胞密度保持所述细胞在所述细胞培养系统中培养时间的至少80％。
11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞截留装置包含大孔微载体。
12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞在无血清培养基中培养。
13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞在至少250L培养基中培养。
14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞是非锚定依赖性细胞。
15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，进一步包含在所述培养步骤之前，悬浮预培养所述细胞。
16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞经过基因修饰以表达所述所关心多肽和/或病毒。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述细胞是CHO细胞。
18.根据权利要求16所述的方法，其中所述多肽是去整合素样金属肽酶含血小板反应蛋白1基元13(ADAMTS13)蛋白。
19.一种组合物，其包含根据前述权利要求中任一项所述的方法产生的所关心多肽和/或病毒。
20.一种组合物，其包含根据前述权利要求中任一项所述的方法产生的重组ADAMTS13蛋白。
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