[发明专利]通过抑制针对三重四脯氨酸(TTP)的天然反义转录物来治疗TTP相关疾病

说明书

技术领域

本申请要求提交于2009年5月6日的美国临时专利申请第61/175,812号的优先权，其通过引用全部并入本文。

本发明的实施方案包括调节TTP和相关分子的表达和/或功能的寡核苷酸。

背景技术

DNA-RNA和RNA-RNA杂交对于核酸功能的许多方面(包括DNA复制、转录和翻译)而言为重要的。杂交对于探测特定核酸或者改变其表达的各种技术而言亦为主要的。反义核苷酸例如通过与靶RNA杂交来扰乱基因表达，从而干扰RNA剪接、转录、翻译和复制。反义DNA具有附加的特征，该特征为DNA-RNA杂合体充当核糖核酸酶H消化的底物，该活性存在于大多数细胞类型中。可将反义分子递送到细胞中，这与寡脱氧核苷酸(ODN)的情况一样，或者它们如RNA分子一样可由内源基因表达。FDA最近批准了一种反义药物，VITRAVENE? (用于治疗巨细胞病毒视网膜炎)，这反映了反义物具有治疗应用。

发明概述

提供本概述以呈现本发明的概述，从而简要地指出本发明的性质和实质。在理解以下的情况下提出本概述：其不会用于解释或限制权利要求的范围或含义。

在一个实施方案中，本发明提供通过使用靶向天然反义转录物的任何区域的反义寡核苷酸来抑制天然反义转录物的作用，引起相应有义基因的增量调节的方法。本文也考虑天然反义转录物的抑制可通过siRNA、核酶和小分子来达到，认为所述siRNA、核酶和小分子在本发明的范围之内。

一个实施方案提供在体内或体外调节患者细胞或组织中的TTP（Tristetraproline）多核苷酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括用长度为5-30个核苷酸的反义寡核苷酸接触所述细胞或组织，其中所述寡核苷酸与以下多核苷酸的反向互补序列具有至少50%的序列同一性，所述多核苷酸包含在SEQ ID NO: 3的核苷酸1-970、SEQ ID NO: 4的核苷酸1-1117 和SEQ ID NO: 5的核苷酸1-297(图3) 之内的5-30个连续核苷酸；从而在体内或体外调节患者细胞或组织中的TTP多核苷酸的功能和/或表达。

在另一个优选的实施方案中，寡核苷酸靶向TTP多核苷酸的天然反义序列，例如SEQ ID NO: 3-5所述的核苷酸，以及其任何变体、等位基因、同源物、突变体、衍生物、片段和互补序列。反义寡核苷酸的实例如SEQ ID NO: 6-10 (图4)所述。

另一个实施方案提供在体内或体外调节患者细胞或组织中TTP多核苷酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括用长度为5-30个核苷酸的反义寡核苷酸接触所述细胞或组织，其中所述寡核苷酸与TTP多核苷酸的反义物的反向互补序列具有至少50%的序列同一性；从而在体内或体外调节患者细胞或组织中TTP多核苷酸的功能和/或表达。

另一个实施方案提供在体内或体外调节患者细胞或组织中TTP多核苷酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括用长度为5-30个核苷酸的反义寡核苷酸接触所述细胞或组织，其中所述寡核苷酸与TTP反义多核苷酸的反义寡核苷酸具有至少50%的序列同一性；从而在体内或体外调节患者细胞或组织中TTP多核苷酸的功能和/或表达。

在优选的实施方案中，组合物包含一种或多种与有义和/或反义TTP多核苷酸结合的反义寡核苷酸。

在另一个优选的实施方案中，所述寡核苷酸包含一个或多个经修饰或取代的核苷酸。

在另一个优选的实施方案中，所述寡核苷酸包含一个或多个经修饰的键。

在又一个实施方案中，所述修饰核苷酸包含经修饰的碱基，该碱基包含硫代磷酸酯、甲基膦酸酯、肽核酸、2’-O-甲基、氟或碳、亚甲基或其他锁定核酸(LNA)分子。优选地，所述修饰核苷酸为锁定核酸分子，包括α-L-LNA。

在另一个优选的实施方案中，将所述寡核苷酸经皮下、肌内、静脉内或腹膜内给予患者。

在另一个优选的实施方案中，将所述寡核苷酸在药物组合物中给予。治疗方案包括至少一次向患者给予反义化合物；然而，可将此治疗修改成在一段时间内包含多次给药。所述治疗可与一种或多种其它类型的疗法组合。

在另一个优选的实施方案中，将所述寡核苷酸封装到脂质体中或附着于载体分子(例如胆固醇、TAT肽)。

其它方面描述于下文。

附图简述

图1：