[发明专利]用真空酶解技术提取虎杖中大黄素、虎杖甙及白藜芦醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从中药中提取有效成份的方法，具体的是用真空酶解技术提取虎杖中大黄素、虎杖甙及白藜芦醇的方法。

背景技术

中药虎杖是蓼科植物虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)的干燥根及根茎，为我国传统中药。分布于陕西南部、甘肃南部、华东、华中、华南、四川、贵州，我省产永善、威信、昭通、峨山、西畴、屏边、金平等。国内外学者对虎杖的化学成分做了许多研究，近年来，仍有不少对虎杖中化学成分的研究报道。概括起来，虎杖的成份复杂，含量较高的成分有蒽醌类化合物、芪类化合物等成分。其中蒽醌类蒽醌成分主要以大黄素为主，芪类化合物主要以白藜芦醇、白藜芦醇甙为主，白藜芦醇甙，又名：虎杖甙。

目前有关虎杖中白黎芦醇的研究大多集中在其药理的研究，对其产品的制备与开发仍处于起始状态。现有生产白藜芦醇的工艺通常是药材粉碎→发醇→醇提→浓缩→有机溶液萃取→回收溶剂→浓缩→醇溶→柱层析→脱色→结晶与重结晶。现有技术主要存在以下问题:

 (1)现有工艺多停留在液液萃取、硅胶柱层析等传统的分离方法，技术相对陈旧、生产周期长，过程繁琐，产品得率和质量不高，存在溶剂残留、目标产物回收率低、有机溶剂消耗大，非环境友好等问题;

(2)虎杖中含有丰富的大黄素和白藜芦醇甙，大黄素和白藜芦醇甙具有重要的生理活性，但大部分工艺未对其进行提取，而是将大黄素等高附加值成分作为废料处理，造成对资源的极大浪费。 

发明内容：

本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种用真空酶解技术提取虎杖中的大黄素、虎杖甙及白藜芦醇。按本发明的方法可从虎杖原料中提取大黄素、虎杖甙及白藜芦醇，且工艺简便，产品得率高，产品质量好。

本发明所采用的技术方案为：具体工艺如下：

（1） 将虎杖药材粉碎至粒径小于5毫米，

（2） 用酶和清水配制酶溶液，

（3） 药材放入容器，加入药材2-4倍量（ w/v）酶溶液，搅拌均匀， 

（4） 酶解  

容器内抽真空，当真空度抽至0.5-0.8Mpa,关闭真空阀，维持真空1-5秒，立刻打开放空破坏真空，反复操作3-5次，50^OC保温至少2小时；

（5） 提取白藜芦醇粗品  

酶解后的药材用浓度70%的乙醇3-5倍量（ w/v），70℃保温提取至少2次、过滤后合并提取液，真空度0.08Mpa减压回收乙醇，得浓缩液，调节浓缩液PH值=9-10，静置沉淀至少7小时，将沉淀物用滤布过滤，滤饼为白藜芦醇粗品滤布下为过滤液；

（6） 制白藜芦醇精品

将步骤（5）得到的白藜芦醇粗品用浓度为50%的乙醇至少3倍量（ w/v）溶解，经大孔树脂吸附洗脱后，洗脱液经浓缩至1倍体积时，静置沉淀至少8小时，将沉淀物用滤布过滤，滤布上的沉淀物用3倍量（ w/v）的乙酸乙酯加热回流溶解，溶液经滤布过滤，将溶液常压回收乙酸乙酯至1倍量时，静置沉淀不少于8小时，将沉淀物用滤布过滤，干燥1-2小时后即为白藜芦醇精品；

（7） 提取大黄素粗品

将步骤（5）得到的过滤液调PH值=2-3，静置沉淀至少8小时，将沉淀物用滤布过滤得大黄素粗品及过滤液；

（8） 制大黄素精品

将步骤（7）得到的大黄素粗品用PH=9-10的碱水溶解，经大孔树脂吸附洗脱，将洗脱液调PH值=2-3时，静置沉淀8小时将沉淀用滤布过滤，将沉淀干燥，用3倍（w/v）乙酸乙酯加热回流溶解，经滤布过滤后将溶液常压回收乙酸乙酯，静置沉淀不少于8小时以上将沉淀用滤布过滤，干燥2小时后得大黄素精品；

（9） 提取虎杖甙粗品

将步骤（7）最后得到的过滤液经大孔树脂吸附洗脱，洗脱液经浓缩后静置沉淀至少8小时，沉淀物用滤布过滤，干燥至少2小时后得虎杖甙粗品；

（10） 制虎杖甙精品

将步骤（9）得到的虎杖甙粗品干燥，用3倍乙酸乙酯加热回流溶解为溶液，滤布过滤，溶液常压回收乙酸乙酯，静置沉淀不少于8小时，沉淀物用滤布过滤，干燥3小时后得虎杖甙精品。

所述的步骤（2）中所述的酶溶液浓度为浓度为0.01%-2%的，其中的酶为果胶酶、淀粉酶、纤维素酶、大豆甙酶或复合纤维素酶之一种。

所述步骤 （6）、（8）、（9）和（10）中的干燥为50^OC真空干燥。