[发明专利]扩增红球菌的PCR引物及检测红球菌的方法有效
申请号: | 201010538254.0 | 申请日: | 2010-11-09 |
公开(公告)号: | CN101967481A | 公开(公告)日: | 2011-02-09 |
发明(设计)人: | 梅海;陈功;郝纯;李雪 | 申请(专利权)人: | 盎亿泰地质微生物技术(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 冯琼;李玉秋 |
地址: | 102200 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 扩增 球菌 pcr 引物 检测 方法 | ||
1.一对扩增红球菌DNA的PCR引物,其特征在于,其上游引物序列如SEQ ID No.1所示,下游引物序列如SEQ ID No.2所示。
2.一种检测红球菌的方法,包含以下步骤:
步骤1:按如下比例配制反应体系:
PCR buffer:10μL
dNTP:4μL
上游引物:1μL
下游引物:1μL
样品DNA:5μL
Taq:0.5μL
ddH2O:28.5μL
其中,样品DNA浓度为100-200ng/μL,上游引物及下游引物浓度为10-20pmol/μL,所述上游引物序列如SEQ ID No.1所示,下游引物序列如SEQID No.2所示;
步骤2:94℃预变性10分钟进行30个PCR循环,循环完毕后72℃延伸10分钟;
步骤3:琼脂糖电泳检测扩增结果。
3.根据权利要求2的方法,其特征在于,步骤2中所述PCR循环参数为:94℃变性1分钟,51℃复性5秒,72℃延伸25秒。
4.根据权利要求2的方法,其特征在于,步骤3所述检测为检测440bp及200bp的条带出现。
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