[发明专利]一种辅酶Q10层析硅胶的在线再生方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种层析硅胶的再生方法，特别指一种辅酶Q10层析硅胶的在线再生方法。

背景技术

辅酶Q10(Ubiquinone，Coenzyme Q10，CoQ10)在氧化呼吸链中起传递电子和质子的重要作用，是形成ATP的关键，具有保护和恢复生物膜结构的完整性、稳定膜电位和增强免疫反应等作用，被广泛应用于心力衰竭、冠心病、高血压病、糖尿病、癌症、艾滋病、急慢性肝炎、帕金森症等疾病的辅助性治疗。目前，辅酶Q10独立成分或复合成分的药品超过100项。

辅酶Q10在欧、美、日等国被广泛用于食品、保健品和化妆品行业，由于其在体内可直接参与代谢，无毒副作用，辅酶Q10的基础研究和临床研究在日本及欧洲国家已广泛深入地展开。近年研究发现辅酶Q10还可参与调控人类信号转导、代谢以及蛋白转运中相关基因的表达，辅酶Q10的市场前景十分广阔。

国内外传统的辅酶Q10生产方法主要有动植物组织提取法、化学合成法和微生物发酵法三种。动植物组织提取法受限于原料中辅酶Q10的含量，提取的产量低、成本高；化学合成法在合成时会发生顺、反异构，得到各类异构体的混合物，需要分离，也增加了合成成本，在化学合成时会加入一些有毒试剂，对纯化获得适用于临床的产品也提出了更高的要求；微生物发酵法是近年兴起的新生产方法，由于微生物细胞易于大规模培养生长，产品完全为天然的全反式构型，生物利用度高，而且相对于化学合成法安全、高效，产品中几乎无化学毒害物质残留，易于分离纯化，临床疗效较好，是最有开发前景的生产方法。

微生物发酵法生产辅酶Q10的提纯过程一般采用如下工艺：发酵液经过过滤后，滤渣干燥制粒，得到辅酶Q10菌粉，菌粉再用有机溶剂浸泡提取。提取液浓缩至一定含量后上硅胶柱层析，采用石油醚、丙酮混合溶剂进行洗脱，洗脱液经减压浓缩干，加无水乙醇结晶，过滤烘干得到辅酶Q10结晶粗品。

硅胶作为一种吸附剂具有很大的比表面积，它吸附力强，广泛应用于医药、化工等多种行业的柱层析分离提纯。硅胶在柱层析过程中，会吸附一些强极性的杂质，堵塞颗粒孔道，使其活性下降。硅胶的生产成本也比较高，且生产过程会污染环境。

在辅酶Q10的提纯过程中，柱层析工序所占成本超过50％，其中硅胶消耗及溶剂损耗更是占据了主要成本，这使得辅酶Q10的生产成本居高不下。

中国专利公开号CN 101445435A介绍了一种辅酶Q10清洁纯化工艺：将辅酶Q10用有机溶剂溶解，应用高压液相制备柱或中压硅胶填充柱，以洗脱剂洗脱，分段收集，获得高纯度的辅酶Q10产品。所述装柱的硅胶经200～300℃高温活化后重复使用10～200次。其硅胶再生方法采用高温活化方法，该方法能耗大，而且每次柱层析过程完成后均需将硅胶从柱内拆下来，不但劳动强度大，而且还会造成溶剂挥发、产生静电着火等安全问题，溶剂损耗也大。高温煅烧的方法虽能将硅胶内的有机杂质去除，但同时也会改变硅胶内部孔径结构，造成硅胶吸附力下降。

公开号CN 1110550C(烟草为原料制备辅酶Q10的方法)、CN101314782A(发酵生产辅酶Q10的方法)、CN 101429108A(分离辅酶Q10的提纯方法)、CN 1762958A(一种提高辅酶Q10合成收率的方法)、CN 101111465A(制备纯净的或富集的辅酶Q10的方法)等专利均有介绍辅酶Q10的柱层析工艺，但均未涉及到柱层析硅胶的重复使用方法。

美国专利US2007/0025976A1公开了一种辅酶Q10的提纯工艺，提到一种硅胶的再生方法：在室温下用1倍柱体积的乙醇洗脱，然后用4～5倍柱体积的己烷在50℃下洗脱。

公开号CN 101249416A(层析中性氧化铝活化再利用方法)涉及一种吸附剂(层析中性氧化铝)再生(活化)的方法，该方法的再生过程包括热水溶解、碱化洗净、氯化更新、脱水、熔烧、过滤和还原，步骤繁多，成本也高，因此不适合用在硅胶的活化再生。