[发明专利]壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法

权利要求书

1.一种壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法，其步骤是：

A、配制0.0000025-0.001mol/L的羧甲基壳聚糖-CdTe量子点溶液：根据羧甲基壳聚糖-CdTe量子点的浓度，用移液管移取0.1~5ml的羧甲基壳聚糖-CdTe量子点溶液于灭菌的10ml容量瓶中，加入高纯水，电阻率大于 18 MΩ·cm，定容，备用；

B、将T25细胞培养瓶中已长满的狗肾细胞用0.05%体积比的EDTA-胰蛋白酶消化为单细胞悬浮液，细胞计数后取1×10⁴~1×10⁷的狗肾细胞接种到到细胞培养皿中，加入含10%体积比的胎牛血清的DMEM营养液，在37℃、5%体积比的CO₂细胞培养箱中培养，使细胞正常贴壁生长繁育，得到用于实施标记的狗肾细胞；

C、待步骤（B）狗肾细胞贴壁生长12~36小时后，向培养皿中加入壳聚糖-量子点荧光探针，于37℃、5%体积比的CO₂细胞培养箱中与细胞共同孵育6~48小时，得到带有荧光的狗肾细胞，弃去营养液，用pH=7.4磷酸盐缓冲溶液洗涤2次，用荧光显微镜观察标记情况。

2.根据权利要求1所述的一种壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法，其特征在于：所述的壳聚糖-量子点荧光探针是由羧甲基壳聚糖和CdTe量子点在水相通过静电络合、共价结合、螯合方式自组装形成。

3.根据权利要求1所述的一种壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法，其特征在于：所述的标记的细胞为狗肾细胞。

4.根据权利要求1所述的一种壳聚糖-量子点荧光探针标记狗肾细胞的方法，其特征在于：所述的羧甲基壳聚糖-CdTe量子点制备过程如下，CdCl₂溶液和巯基乙酸溶液混合均匀后用NaOH 溶液调整其pH值为碱性，再向该溶液中加入新制备的KTeH₄溶液，将此混合液转入聚四氟乙烯微波消解罐，放入可控温的微波加热系统进行加热，反应完成后待溶液冷却至室温，得到CdTe 量子点溶液，将其与羧甲基壳聚糖溶液混合反应生成羧甲基壳聚糖-CdTe量子点。