[发明专利]牛樟芝抗癌活性物质、制备方法及其用途

权利要求书

1.一种牛樟芝抗癌活性物质，是将牛樟芝菌丝体经过下列步骤所产生者：

步骤1：将牛樟芝菌丝体以液体酸酵培养；

步骤2：将步骤1所得菌丝体经过乙醇萃取，得到乙醇萃取物；

步骤3：将步骤2所得乙醇萃取物浓缩后溶于水中，并加入等体积的乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯萃取物；

步骤4：将步骤3所得乙酸乙酯萃取物以胶体管柱层析纯化，并以正己烷/乙酸乙酯梯度流洗液为流洗液，以80％正己烷/20％乙酸乙酯至70％正己烷/30％乙酸乙酯流洗可得到片段f、以70％正己烷/30％乙酸乙酯到60％正己烷/40％乙酸乙酯流洗可得到片段g；

步骤5：将步骤4所得流洗液片段g以胶体管柱层析纯化，并以正己烷/乙酸乙酯梯度流洗液，以取得流洗液片段E、F、G、H、I；其中片段E为80％/20％正己烷/乙酸乙酯至75％/25％正己烷/乙酸乙酯流洗所得到，片段F、G为75％/25％正己烷/乙酸乙酯流洗依序分别所得到，片段H为75％/25％正己烷/乙酸乙酯至70％/30％正己烷/乙酸乙酯流洗所得到，片段I为70％/30％正己烷/乙酸乙酯流洗所得到；以及

步骤6：将步骤5所得的流洗液片段E、F、G、H、I，以胶体管柱层析纯化出4-安卓奎诺尔B；

其中该乙酸乙酯萃取物、流洗液片段f、流洗液片段g、流洗液片段E、F、G、H、I及4-安卓奎诺尔B，即为牛樟芝抗癌活性物质。

2.如权利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述菌丝体为寄存于财团法人食品工业发展研究所生物资源保存及研究中心的牛樟芝BCRC35716。

3.如权利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述液体酸酵培养步骤为：在含有2％葡萄糖与2％麦芽萃取物的发酵培养液内，以20～25℃、槽压0.5～1vvm、20～100rpm搅拌速率条件下培养。

4.如权利要求3所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述发酵液的pH值为4.5～5.5。

5.如权利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述乙醇萃取步骤为：将牛樟芝菌丝体干燥后，以90～99％乙醇与该菌丝体混合，以均质机混合之。

6.如权利要求5所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述牛樟芝菌丝体与乙醇的比例为1∶10～1∶50(g/ml)。

7.如权利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述步骤4所用的胶体管柱为硅胶管柱，230-400筛孔，750-75mm。

8.如权利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述步骤5所用的胶体管柱为硅胶管柱，230-400筛孔，420-25mm。

9.如权利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述于步骤6的胶体管柱层析所用的胶体管柱为硅胶管柱Luna 5u Silica(2)100A column(4.6×250nm)，且其所用的流洗液为正己烷/乙酸乙酯混合液，其比例为80∶20。

10.如权利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物质，其特征是，所述抗癌活性物质是可抑制肝癌细胞、大肠癌细胞及摄护腺癌细胞的增殖。

11.一种抗癌组成物，其特征是，包含有权利要求1所述的有效量牛樟芝抗癌活性物质，以及适当的稀释剂、赋形剂或载体。

12.如权利要求11所述的抗癌组成物，其特征是，所述抗癌活性物质是可抑制肝癌细胞、大肠癌细胞及摄护腺癌细胞的增殖。

13.一种4-安卓奎诺尔B的用途，其是用于制备抗癌的药物。

14.如权利要求13所述的用途，其特征是，所述4-安卓奎诺尔B具有下列化学结构：

15.如权利要求13所述的用途，其特征是，所述抗癌的药物是可抑制肝癌细胞、大肠癌细胞及摄护腺癌细胞的增殖。