[发明专利]一种新的硫酸依替米星有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种硫酸依替米星杂质含量检测方法，其特征在于，经过以下步骤：精密称取氨基糖苷有关物质ETM-10，ETM-7，ETM-12，ETM-6，ETM-5，ETM-3对照品各适量，分别加水制成每1ml分别含相关杂质约0.001-10mg的对照品储备溶液；精密吸取以上各有关物质对照品储备溶液适量，转移至同一容量瓶中，加水稀释至刻度，制备成有关物质混合对照品溶液，其中各有关物质浓度为1-1000μg/ml，色谱柱：Gemini NX C18(4.6mm×150mm，5μm)；流动相：A相：水-氨水-冰醋酸(98～75∶2.0～5.0∶0.1～1.0)，B相：甲醇，采用梯度洗脱的方法，用HPLC-ELSD进行测定，面积归一化法计算其含量。

流动相梯度

2.如权利要求1所述的检测方法，有关物质对照品储备溶液的浓度为0.001-10mg。

3.如权利要求1所述的检测方法，有关物质混合对照品溶液的浓度为1-1000μg/ml。

4.如权利要求1所述的检测方法，检测用流动相由A相和B相组成，其中A相：水-氨水-冰醋酸(98～75∶2.0～5.0∶0.1～1.0)，B相：甲醇。

5.如权利要求1所述的检测方法，采用梯度洗脱的方法，流动相梯度为：

流动相梯度

6.如权利要求1所述的检测方法，采用HPLC-ELSD进行测定，面积归一化法计算其含量。

7.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，经过以下步骤：

精密称取氨基糖苷有关物质对照品(ETM-10，ETM-7，ETM-12，ETM-6，ETM-5，ETM-3；均从原料药硫酸依替米星中分离得到，纯度均＞95％)各适量，分别加水制成每1ml分别含相关杂质约0.001-10mg的对照品储备溶液；精密吸取以上各氨基糖苷有关物质对照品储备液各适量，转移至同一容量瓶中，加水稀释至刻度，制备成氨基糖苷类有关物质混合对照品溶液，其中各有关物质浓度为1-500μg/ml)。色谱柱：Gemini NX C18(4.6mm×150mm，5μm)。流动相：A相：水-氨水-冰醋酸(98～85∶2.0～4.0∶0.1～0.5)，B相：甲醇。采用梯度洗脱的方法，用HPLC-ELSD进行测定，面积归一化法计算其含量。

8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，经过以下步骤：

精密称取氨基糖苷有关物质对照品(ETM-10，ETM-7，ETM-12，ETM-6，ETM-5，ETM-3；均从原料药硫酸依替米星中分离得到，纯度均＞95％)各适量，分别加水制成每1ml分别含相关杂质约0.001-10mg的对照品储备溶液；精密吸取以上各氨基糖苷有关物质对照品储备液各适量，转移至同一容量瓶中，加水稀释至刻度，制备成氨基糖苷类有关物质混合对照品溶液，其中各有关物质浓度为10-300μg/ml)。色谱柱：Gemini NX C18(4.6mm×150mm，5μm)。流动相：A相：水-氨水-冰醋酸(96∶3.6∶0.4)，B相：甲醇。采用梯度洗脱的方法，用HPLC-ELSD进行测定，面积归一化法计算其含量。

流动相梯度

在上述的方法中一般可以采用如下的色谱条件；

流速0.8ml/min；

柱温：30℃；

进样量：10μl；

ELSD参数：

漂移管温度：105℃；

载气流速：2.6L/min；

Gain值：1。