[发明专利]裸花紫珠制剂中木犀草素的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及裸花紫珠制剂中有效成分含量的测定方法，尤其涉及裸花紫珠制剂中木犀草素含量的测定方法。

背景技术

裸花紫珠(Callicarpanudiflorae)为马鞭草科小灌木植物，有止血、抗菌、收敛、解毒、镇痛、以及促进愈合的作用。裸花紫珠还可抑制毛细血管的通透性，对早期的炎症渗出、肿胀有明显的抗炎性反应作用，同时可明显缩短出、凝血时间，止血效果显著。同时，裸花紫珠还具有保肝降酶的作用，可用于治疗病毒性肝炎。裸花紫珠的主要成分为黄酮甙、缩合鞣酸、中性树脂、酚类、多糖、羟基化合物及镁、钙、铁盐等，其中，紫珠萜酮、芹菜素、毛蕊花糖苷、木犀草素及其配糖体等黄酮类物质的含量约为5%。木犀草素具有抗菌、抗病毒和消炎的作用，临床主要用于用于慢性支气管炎、呼吸道疾病、SARS，肝炎等。

目前市场上裸花紫珠制剂主要有颗粒剂、胶囊、片剂、分散片、合剂、软胶囊、栓剂等，上述制剂的质量标准仅部分制剂进行了总黄酮的含量测定，测定方法为紫外分光光度法，定量很不准确，没有关于裸花紫珠制剂中木犀草素的含量测定方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种能准确测定含量的裸花紫珠制剂中木犀草素含量的测定方法。

本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的：

裸花紫珠制剂中木犀草素含量的测定方法，采用高效液相色谱法测定裸花紫珠制剂供试品溶液中的木犀草素含量，其特征是，色谱条件与系统适用性为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为有机溶剂–酸性溶液，流动相中有机溶剂的重量百分比为50-70%，酸性溶液的重量百分比为30-50%，酸性溶液浓度为0-0.3%，检测波长为340-355nm。

所述流动相中的有机溶剂包括甲醇或乙腈中的一种，甲醇和乙腈均为色谱纯；酸性溶液的酸包括醋酸或磷酸中的一种，醋酸和磷酸均为分析纯。

所述色谱条件与系统适用性试验的较优条件为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇–磷酸溶液为流动相，流动相中甲醇的重量百分比为60%，磷酸溶液的重量百分比为40%，磷酸溶液的浓度为0.1%，检测波长为348nm。

所述裸花紫珠制剂供试品溶液的制备方法是：取裸花紫珠制剂，相当于裸花紫珠浸膏0.1-3g，称定，置具塞三角瓶中，加入浓度为50-100%乙醇15-50ml，称定重量，在超声处理15-45分钟，放冷，再称重量，加浓度为50-95%乙醇补足减失的重量，混匀，滤过，吸取续滤液10ml于平底烧瓶内，加盐酸1-3ml,水浴水解2h,放冷，水解液全部转移至25ml量瓶中，用浓度为50-100%乙醇多次洗涤烧瓶，将洗涤液转移至量瓶中，并用浓度为50-100%乙醇稀释至刻度，摇匀，取适量通过0.45μm的微孔滤膜取续滤液，即得。

所述裸花紫珠制剂供试品溶液的较优制备方法是：取裸花紫珠颗粒2袋，研细，取2g，相当于裸花紫珠浸膏0.53g,称定，置具塞三角瓶中，加入浓度为70%乙醇25ml，称定重量，在超声处理30分钟，放冷，再称重量，加浓度为70%乙醇补足减失的重量，混匀，滤过，吸取续滤液10ml于平底烧瓶内，加盐酸2ml,水浴水解2h,放冷，水解液全部转移至25ml量瓶中，用浓度为70%乙醇多次洗涤烧瓶，将洗涤液转移至量瓶中，并用浓度为70%乙醇稀释至刻度，摇匀，取适量通过0.45μm的微孔滤膜取续滤液，即得。

所述裸花紫珠制剂为：以裸花紫珠为主药的单方制剂。

所述裸花紫珠制剂为：含有裸花紫珠的复方制剂。

所述裸花紫珠制剂为：含有裸花紫珠的固体制剂、液体制剂、外用制剂、软胶囊、滴丸、和注射液。

所述固体制剂为颗粒、胶囊、片剂、分散片、散剂、丸剂；液体制剂为合剂、口服液、糖浆剂；外用制剂为栓剂、软膏剂、乳膏剂。

本发明的有益效果是：能准确有效的测定裸花紫珠制剂中木犀草素的含量，误差小，可进一步提高裸花紫珠制剂的质量标准，确保裸花紫珠制剂的质量和临床效果。

1.1色谱条件的选择  色谱柱：Dikma Diamonsil C18(钻石)(250×4.6mm，5mm)，流动相：甲醇–0.1%磷酸(甲醇与磷酸的体积百分比为62：38)，流速1mL/min；检测波长348nm，柱温：室温。理论板数按木犀草素记不低于3000。在此条件下对照品、供试品均在相同保留时间出现色谱峰，见图1-图2。

1.2提取条件的选择。