[发明专利]一种褐藻多酚的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及海洋生物领域，特别涉及一种从褐藻类生物中提取褐藻多酚的方法。

背景技术

褐藻多酚广泛存在于海洋植物褐藻中，它以苯三酚为结构单元，主要分为寡聚间苯三酚和Eckol类多酚。研究证明褐藻多酚具有抗心血管疾病、抗菌、抗病毒、溶藻、抗氧化、抗糖尿病综合征、保肝以及抑制赖氨酸酶透明质酸酶等广泛的生物活性。褐藻多酚具有不同于陆地植物多酚的结构及活性，是一类独特的天然物质。

目前有报道的关于褐藻多酚的提取方法主要采用乙醇溶液室温避光提取得粗提液，然后经有机溶剂洗涤、减压蒸馏等步骤得到褐藻多酚精提物。但是这些方法得到的产品具有咖啡因、生物碱含量较高，产品安全性低、耗时长等缺点，因此不利于工业化生产。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种褐藻多酚的提取方法，与文献中方法相比，具有纯度高、收率高、生产成本低，有利于工业化生产的特点。

本发明采用以下的技术方案：用含有褐藻多酚的生物材料作为原材料，进行以下步骤的操作：

原料预处理：称取一定量新鲜的含有褐藻多酚的生物原材料，去除沉淀物、浮游植物以及其它附着物，用自来水反复冲洗干净，烘干、进行破碎；

浸取：将破碎后的生物材料按湿重加入0.002～0.02％的抗氧化剂，与含有机溶剂50～90％的水溶液按1∶2～9的比例混合，充分搅拌后置于超声波中处理3～6min，放入40～80℃恒温水浴中、振荡、避光浸取1～6小时，分离得上清液，减压蒸馏除去有机溶剂；

冷却洗涤：将浸取后溶液置于0～4℃冷柜中静止2～8小时，分离得上清液，用体积比为1∶1～4有机溶剂水溶液洗涤上清液，减压蒸馏除去有机溶剂；

吸附：将上述步骤得到的溶液用大孔树脂进行吸附，吸附饱和后，用2BV蒸馏水洗涤；

洗脱：用含50～85％有机溶剂的洗脱剂进行洗脱解吸，并收集目标产物；

冷冻干燥：目标产物经冷冻干燥后得到成品褐藻多酚。

所述含有褐藻多酚的生物材料为生活于海洋或淡水中，含有褐色色素的丝状或丝原植体的藻类。

所述含有褐藻多酚的生物材料为马尾藻属褐藻或海带属植物。

所述浸取步骤中加入的抗氧化剂为叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、2，6-二叔丁基化羟基甲苯(BHT)、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠中的一种或几种。

所述浸取步骤中用到的有机溶剂为丙酮、甲醇、甲苯、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚中的一种或几种。

所述浸取步骤中上清液的分离方法为虹吸、离心、过滤中的一种或几种。

所述冷却洗涤步骤中用到的有机溶剂为丙酮、甲醇、甲苯、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚中的一种或几种。

所述洗脱步骤中的有机溶剂为乙醇、丙酮、甲醇、甲苯、乙酸乙酯、氯仿中的一种或几种。

所述最终获得的褐藻多酚成品为固态或液态。

所述最终获得的褐藻多酚成品为固态。

浸取过程中用到的溶液中还经常加入微量的NaCl，(NH₄)₂SO₄，KCl等盐类用来加强浸取的效果；在第一次将上清液浸取完毕后，滤渣再重复浸提一次，合并两次提取液减压旋蒸除去有机溶剂。

本发明与现有方法相比，具有以下优点：(1)本发明首先采用有机溶剂粗提取多酚，产品纯度、提取率相对水提取法均有提高，产品的氧化程度相对水提取法较低；(2)本发明中浸取步骤加入了一定量的抗氧化剂，有效地防止了褐藻多酚的氧化；(3)粗提之后采用大孔树脂进行吸附分离，这种方法简单，操作方便，能耗较低，操作条件温和，避免了有效成分失活，产品收率和纯度高利于工业化、规模化生产。综上所述，本发明具有收率高、生产成本低，利于工业化生产的特点。

具体实施方式

结合具体实施例进行说明。

实施例1

通过以下步骤进行褐藻多酚的提取：

第一步：称取1000g新鲜海带，去除沉淀物、浮游植物以及其它附着物，然后用自来水反复冲洗干净，在105℃烘箱内烘至恒重，得到固形物约为100g，用组织捣碎匀浆机破碎；

第二步：将破碎后的生物原材料按湿重加入0.002％叔丁基对羟基茴香醚(BHA)，与含乙醇70％的水溶液按1∶2的比例混合，充分搅拌后置于超声波中处理3min，放入60℃恒温水浴中、振荡、避光浸取1小时，分离上清液，减压蒸馏除去有机溶剂；