[发明专利]蓖麻凝集素120在抗甲型流感病毒方面的应用

说明书

技术领域

本发明涉及蓖麻凝集素在抑制病毒方面的应用，具体涉及蓖麻凝集素120在抑制甲型流感病毒繁殖和扩散方面的应用。

背景技术

一、甲型流感病毒简介

流行性感冒(Influenza)简称流感，是一种由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，临床表现为起病急、高热、肌痛、头痛伴有严重不适、干咳、咽喉痛或鼻炎，多数患者可在一到两周内恢复。但流行性感冒并不同于一般感冒，流感病毒的可怕之处在于传染快速、散播区域广泛以及对体弱者所引起并发症会导致死亡。流感潜伏期短、经呼吸道飞沫传播，传播迅速，抗原易变异，人群对变异株普遍易感，控制难度大。流感流行呈一定季节性，但大流行可发生在任何季节，并且可以迅速蔓延至全球。我国流感南北方流行季节不同，北方地区一般在冬春季流行，南方四季都有病例发生，发病高峰在夏季和冬季。流感病毒可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，甲型和乙型流感对人类威胁较大，其中甲型流感抗原变异频繁，可引起世界性大流行，对人类威胁最大。流感被列为我国丙类法定传染病。

甲型流感病毒属正黏病毒科，基因组由8条负链单股RNA组成，分别编码病毒RNA多聚集酶(PB1，PA和PB2)、核衣壳蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、血凝素(HA)、基质蛋白(M1和M2)、非结构蛋白(NS1和NS2)和线粒体相关蛋白(PB1-F2)。其中HA和NA是糖基化蛋白，其余都是非糖蛋白。HA和NA也是病毒表面的主要抗原，根据HA和NA的不同，甲型流感病毒可分为16个HA亚型(H1-H16)和10个NA亚型(N1-N10)。HA在病毒表面以三聚体的形式存在，可分为球状头部和茎部；根据亚型和毒株不同，每个亚基含有3-12个N-糖基化位点；HA主要在病毒侵染宿主细胞的早期发挥作用，HA通过与宿主细胞膜上唾液酸糖链受体(唾液酸低聚糖)结合而将病毒吸附于宿主细胞表面，在宿主胞内吞时协助病毒包膜与宿主细胞膜相互融合。NA以同源四聚体的形式存在，具有蛋白水解酶活性，能够水解唾液酸，促进子代成熟病毒的释放，并可协助HA对宿主细胞的吸附。病毒蛋白由病毒本身的RNA聚合酶合成，这种酶缺乏校正功能，分节段的甲型流感病毒基因组又使病毒具有很高基因重组率，两种因素共同导致了甲型流感病毒的高突变性。另外，病毒蛋白合成后往往利用宿主体内的翻译后修饰体系进行自身蛋白的糖基化修饰，不同宿主中用于蛋白糖基化的糖基转移酶和糖苷酶的组成，比例等均不相同，从而导致HA和NA糖基化程度和糖链结构的不同。因此，病毒基因组的高突变性和宿主依赖性的病毒蛋白糖基化机制共同造成了流感病毒的多样性。

二、蓖麻凝集素简介

作为最早发现的植物凝集素之一，蓖麻凝集素一直受到世人高度关注。目前，蓖麻凝集素(RCA)细胞因子ELISA试剂盒已作为生化试剂产品在商场上进行销售。蓖麻凝集素作为一种具有较强专一性的生物活性物质，在肿瘤与癌症的诊断上具有很好的应用前景。然而，经过近二十年的研究，蓖麻凝集素仍未能有效地应用于临床疾病诊断与治疗，归纳起来有以下几点原因影响了蓖麻凝集素的实际应用价值：(1)尽管蓖麻凝集素对RCA受体有很好的专一性，但RCA受体的存在范围和种类过大，使RCA对特定细胞的专一性相对较低，不便于通过它与受体的结合来鉴定特定类型的细胞；(2)蓖麻凝集素的体内毒性控制研究还有待深入，RCA虽然通过偶联支持物或药物，能在体内准确地与RCA受体结合，但RCA本身具有很强的生理毒性，有可能对人体带来潜在危害。RCA不同于病毒与单克隆抗体，其体内作用机制、降解途径与自身毒性控制方法也尚不明确。

三、传统治疗药物简介

目前，国际上公认的流感治疗药物主要有两种：一是罗氏公司研发的磷酸奥司他韦胶囊(商品名：“达菲”)。达菲是一种非常有效的流感治疗用药，并且可以大大减少并发症(主要是气管与支气管炎、肺炎、咽炎等)的发生和抗生素的使用，因而是目前治疗流感的最常用药物之一，也是公认的抗禽流感、甲型H1N1流感最有效的药物之一。最近流行的H1N1甲型流感，感染早期用达菲(Oseltamivir)有效。另一个是葛兰素史克公司研发的扎纳米韦吸入粉雾剂(商品名：“乐感清”或“瑞乐沙”)。本品通过抑制流感病毒的神经氨酸酶，从而改变了流感病毒在感染细胞内的聚集和释放。体外试验时发现，当药物浓度不断增加时，仍有流感病毒对扎那米韦的敏感性下降。经分析，这与病毒突变引起神经氨酸酶及血细胞凝集素二者或其一的氨基酸发生改变有关。