[发明专利]一种适用于植物组织培养的抑菌剂组合物及使用方法

权利要求书

1.一种适用于植物组织培养的抑菌剂，其特征在于：其组成成分及配比为：

在抑菌剂组合物总体积100ml中含有：

ε-聚赖氨酸2.5ml，其中有效含量≥50％、

异噻唑啉酮混合物，其中有效含量≥50％ 22～29.5ml、

中草药水提物10～15ml：中药水提物由诃子、千里光及香薷1∶1∶2加水浸泡4h后用温火煎煮而成，每100ml中含生药4g、

柠檬酸、苯甲酸钠水溶液，其浓度为3.5％ 2.5ml、

稳定剂：MgCl₂，水溶液，其浓度5.5％ 3.5ml、

无离子水47.0～59.5ml。

2.根据权利要求1所述的一种适用于植物组织培养的抑菌剂，其使用方法：

1)用于植物外植体消毒处理中，先用抑菌剂浸泡后，再常规消毒处理，可减少升汞或次氯酸钠的处理时间；

2)在初代或继代培养基中加入抑菌剂0.25～0.4％，可有效减少或防止真菌和细菌的污染；

3)应用在植物开放式组织培养中，如植物培养后期的壮苗生根阶段，加入该抑菌剂，可省去培养基高压灭菌程序，不需超净工作台也可接种。

3.根据权利要求2所述的一种适用于植物组织培养的抑菌剂，其使用方法：

应用该抑菌剂时，植物组织培养可在无菌或相对较少有菌条件下实施；其详细过程包括：

(1)按先后顺序取ε-聚赖氨酸2.5ml、异噻唑啉酮混合物，有效含量≥50％，的22～29.5ml、中草药水提物10～15ml、柠檬酸、苯甲酸钠2.5ml，放入100ml容量瓶中，震荡混合均匀，再加入稳定剂3.5ml，用无离子水定容于100ml，倒入棕色试剂瓶中，放置于4℃冰箱中保存备用；

(2)将培养基煮沸溶解，进行常规的高温高压灭菌。待培养基冷却至45℃左右后，以配制1L培养基计算，在培养基中加入该抑菌剂2.5～4.0ml，然后分装于已高温高压灭菌的培养容器内；

(3)分装后，用封口膜、聚丙烯膜、玻璃纸或硫酸纸扎紧瓶口；

(4)将分装封口后的培养基，放入操作室冷却，备用；

(5)植物外植体在超净工作台内进行常规消毒处理后，将其直接接种于含有抑菌剂的培养基中；

(6)接种后的日常管理：将接种后的培养材料置于满足植物组织培养的温度、光照条件的房间或设施内进行培养；

(7)壮苗生根培养可以在相对较少有菌的条件下实施：培养基无需高压灭菌，接种也不需超净工作台。

4.根据权利要求2所述的一种适用于植物组织培养的抑菌剂，其使用方法：

1)在制备该抑菌剂组合物时，按先后顺序取ε-聚赖氨酸2.5ml、异噻唑啉酮混合物(有效含量≥50％)22～29.5ml、中草药水提物10～15ml、柠檬酸、苯甲酸钠等2.5ml，放入100ml容量瓶中，震荡混合均匀，再加入稳定剂3.5ml，用无离子水定容于100ml，倒入棕色试剂瓶中，放置于4℃冰箱中保存备用；

2)配制培养基时，用量筒将母液按顺序依次按需要量吸取各种成分，并混合在一起。将不锈钢锅内加入一定的蒸馏水或其他洁净水和蔗糖，加入琼脂粉，加温溶解，再加蒸馏水定容至所需体积，用氢氧化钠或盐酸将pH调至培养植物所需的要求值；

3)按照组织培养不同植物和不同阶段需要加入不同的植物激素及用量；

4)将培养基煮沸溶解，进行常规的高温高压灭菌；

5)待培养基冷却至45℃左右后，以配制1L培养基计算，在培养基中加入该抑菌剂2.5～4.0ml，然后分装于已高温高压灭菌的培养容器内；

6)分装后，用封口膜扎紧瓶口。将分装封口后的培养基，放入操作室冷却，备用；

7)植物外植体在超净工作台内进行常规消毒处理后，将其直接接种于含有抑菌剂的培养基中；

8)接种后的日常管理：将接种后的培养材料置于满足植物组织培养的温度、光照条件的房间或设施(如温室)内进行培养；

9)壮苗生根培养可以在相对较少有菌的条件下实施：培养基无需高压灭菌，接种也不需超净工作台。