[发明专利]一种测定厌氧发酵过程中的物质的含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种测定厌氧发酵过程中间产物以及底物含量的方法，尤其涉及一种厌氧发酵过程中液相产物挥发性脂肪酸中乙酸、丙酸、丁酸及乙醇的定量测定方法。

背景技术

在废水厌氧生物处理过程中，挥发性脂肪酸(VFAs)是一种很重要的厌氧发酵中间产物，因此通过监测废水厌氧发酵过程中VFA的变化情况，可以很好地了解有机物质的降解过程以及甲烷菌的活性和系统的运行情况(Lahav et al.Environ.Sci.Technol.2002，36，2736)。传统的VFA测定方法主要有比色法、柱色谱法、纸色谱法、滴定法以及目前常用的气相色谱法。然而这些方法都存在一定局限性，如比色法只能测单个酸，柱色谱法和纸色谱法分离时间长、准确度低、重现性差，滴定法只能测定混合酸，气相色谱法则需进行加酸酸化、过滤预处理(Lahav et al.Environ.Sci.Technol.2002，36，2736)。因此，建立灵敏、快速的VFA的分析方法对于厌氧反应器运行过程的调控具有重要意义。

近红外光谱技术(FT-NIR)是近年来迅速发展起来的一种高新分析技术，具有简便、快速、低成本、无污染、对样品无破坏性以及可实现多组分同时测定等优点，被广泛应用于食品、纺织、制药、石油、化工、酿酒等行业的质量监测、控制和相关研究(Sasic et al.Anal.Chem.2001，73，64)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种测定厌氧发酵过程中的物质的含量的方法。

本发明提供的方法包括如下步骤：

1)利用近红外光谱仪对厌氧发酵过程中的发酵液进行扫描测定，得到近红外光谱信号；

2)利用现有技术测定步骤1)的发酵液中待测物质的含量；

3)建立关于步骤1)得到的近红外光谱信号与步骤2)得到的待测物质的含量的近红外光谱多元校正模型；

4)再次利用近红外光谱仪对所述厌氧发酵过程中的发酵液进行扫描测定，得到近红外光谱信号；

5)根据步骤3)得到的近红外光谱多元校正模型与步骤4)得到的近红外光谱信号，得到厌氧发酵过程中的物质的含量。

进一步，上述厌氧发酵过程中的物质是可溶性有机物、挥发性脂肪酸或乙醇。

在一种情况下，上述厌氧发酵过程中的物质是可溶性有机物，优选是可溶性糖；所述现有技术是蒽酮法。

在另一种情况下，上述厌氧发酵过程中的物质是挥发性脂肪酸，优选是乙酸、丙酸或丁酸；所述现有技术是气相色谱法。

在又一种情况下，上述厌氧发酵过程中的物质是乙醇；所述现有技术是气相色谱法。

本发明提出近红外光谱快对厌氧发酵过程中蔗糖和挥发性脂肪酸浓度的定量测定方法，通过建立的多元校正模型，本发明能够对厌氧发酵过程中蔗糖和挥发性脂肪酸浓度变化进行快速测定。本发明建立的方法只需简单样品前处理，与传统方法相比，近红外测定值与传统分析值之间的相对偏差均保持在10％以内，可以节省大量的分析时间和花费，从而本发明为厌氧反应发酵的过程监测提供了一个很好的工具。

附图说明

图1为建模时样品的近红外谱图。

图2为蒽酮法测糖的标准曲线。

图3为各组分校正集预测结果。

图4为实测样品的近红外谱图。

图5为采用建立的近红外方法测定待测实际样品结果和用对照方法测定结果的比较。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。

下述实施例中，如无特殊说明，均为常规方法。

本发明中所有发酵液在取样后，均在12000r/min条件下离心5min，取上清夜。然后针对该上清液进行近红外光谱扫描、蒽酮法测定以及气相色谱测定等步骤。

所有发酵液的近红外光谱都是采用傅里叶变换近红外光谱仪，在室温下用光纤探头进行测定。

实施例1、厌氧发酵过程中蔗糖的测定