[发明专利]菊糖芽孢乳杆菌以及采用该菌株发酵制备D-乳酸的方法有效
申请号: | 201010241912.X | 申请日: | 2010-07-30 |
公开(公告)号: | CN101974447A | 公开(公告)日: | 2011-02-16 |
发明(设计)人: | 钱志良;劳含章;沈永喜;雷肇祖;孙建荣;潘荣华 | 申请(专利权)人: | 上海新立工业微生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N15/01;C12P7/56;C12R1/01 |
代理公司: | 上海金盛协力知识产权代理有限公司 31242 | 代理人: | 罗大忱 |
地址: | 200125 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芽孢 杆菌 以及 采用 菌株 发酵 制备 乳酸 方法 | ||
1.菊糖芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus inulinus)CGMCC No.3997。
2.采用权利要求1所述的菊糖芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus inulinus)CGMCC No.3997发酵生产D-乳酸的方法,其特征在于,包括(1)发酵种子的培养步骤、(2)D-乳酸发酵步骤和(3)提取和精制D-乳酸步骤。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,将步骤(1)培养好的种子接种于发酵培养基上,接种量为3%-8%(v/v),培养温度为35-45℃,pH为5-6,发酵采用交替批式培养,从开始培养至6小时之间,利用自身排出的二氧化碳气体作为厌氧环境,为厌氧发酵,6-30小时之间为微氧发酵,30小时至培养结束利用自身排出的二氧化碳气体作为厌氧环境,为厌氧发酵,发酵周期为40-50小时,获得含有D-乳酸的发酵醪液,然后从发酵醪液中,提取和精制D-乳酸。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,微氧发酵时,通入空气,空气通入量采用氧化还原电位和二氧化碳变化进行控制,氧化还原电位为-150~-180,尾气二氧化碳含量在15-20%。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,提取和精制D-乳酸,包括如下步骤:
(a)将获得的发酵醪液,30~40℃下通过管式微滤膜过滤器,精度为10-80nm,过滤时间为5~10小时,过滤后,发酵醪液的体积浓缩倍数为15~25倍;
(b)在获得的清液中,加入重量浓度为95~98%的硫酸,进行酸解反应,反应时间为1~2小时,生成D-乳酸与硫酸钙,过滤,去除硫酸钙,得到重量含量为8~10%的D-乳酸清液;
(c)将D-乳酸清液30~40℃下通过卷式超滤膜过滤器,精度为4000-8000Doltons,超滤时间5~10小时,过滤后,D-乳酸重量含量为7~9%;
(d)将步骤(c)获得的产物,30~40℃下通过卷式纳滤膜过滤器,精度为400-800Doltons,纳滤时间为5~10小时,过滤后,D-乳酸重量含量为6~8%;
(e)将步骤(d)获得的产物蒸发浓缩至原体积的10~12倍,获得浓缩物;
(f)将步骤(E)的浓缩物,在一级短程蒸馏装置中真空蒸馏,进行脱水浓缩和脱氢组分,浓缩真空度为0.8-0.95Mpa,浓缩温度为50-90℃,由蒸馏装置的底部获得成品;
(g)由一级短程蒸馏装置底部出来的物料,送入二级短程蒸馏装置进行纯化分离,蒸馏真空度为10-100pa,蒸馏温度为50-100℃,由二级短程蒸馏装置底部获得成品。
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