[发明专利]滑菇多糖提取物的制备方法

权利要求书

1.一种滑菇多糖提取物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

(1)将滑菇干制品用热水浸泡，充分溶胀；之后，打浆得到滑菇浆液；

(2)在上述滑菇浆液中加入胰蛋白酶在37℃下保温1小时；然后再加入纤维素酶在55℃下保温2小时；然后升温到80℃下保温3小时，之后，收集第一次提取液和沉淀；将第一次沉淀加等量水用超声波在功率400W下超声提取30分钟，之后收集第二次提取液和残渣；清洗残渣，滤取清洗残渣的液体得到第三次提取液；合并三次提取液；将合并后的提取液减压浓缩至总体积的1/6-1/10；其中，胰蛋白酶的活力为2500U/mg，添加量为滑菇浆液重量的0.012％；纤维素酶的活力为1000U/mg，添加量为滑菇浆液重量的0.008％；

(3)将减压浓缩后的提取液中加入无水乙醇，使得溶液中乙醇体积百分比浓度为60-80％，醇沉得到粗滑菇多糖；

(4)将步骤(3)得到的粗滑菇多糖进一步纯化得到滑菇多糖提取物。

2.根据权利要求1所述的滑菇多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的纯化方法包括下述步骤：

(一)将粗滑菇多糖溶于水，加热到60℃并搅拌到溶解，再加入质量百分比浓度为40-50％的三氯乙酸，使得三氯乙酸最终的质量百分比浓度达到4-6％，4℃静置24小时后离心去除沉淀，取上清液；

(二)在上清液中加入无水乙醇，使得溶液中乙醇的体积百分比浓度为75％，醇沉得到滑菇多糖；

(三)将步骤(二)得到的滑菇多糖沉淀再加入无水乙醇溶解，使得溶液中乙醇的体积百分比浓度为75％，醇沉得到滑菇多糖；将得到的滑菇多糖沉淀再溶于水，如此反复，逐步提高沉淀滑菇多糖所需要的溶液中的乙醇含量，最后将沉淀出的滑菇多糖冷冻干燥，即得到滑菇多糖提取物。

3.根据权利要求1所述的滑菇多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的纯化方法包括下述步骤：

(一)将粗滑菇多糖重新溶解在水中，加热到60℃并搅拌到溶解，加入质量百分比浓度为40-50％的三氯乙酸溶液，使得三氯乙酸最终的质量百分比浓度达到4-6％，4℃静置24小时后离心去除沉淀取上清液；

(二)在上述上清液中加入无水乙醇，使得溶液中乙醇的体积百分比浓度为75％，醇沉得到滑菇多糖；得到的滑菇多糖沉淀再溶解于水中，加热到60℃并搅拌到溶解得到滑菇多糖溶液；

(三)上述滑菇多糖溶液上大孔吸附树脂，用乙醇洗脱，收集洗脱液；将洗脱液浓缩到原液体积的1/4-1/8；在洗脱液的浓缩液中加无水乙醇，醇沉得到滑菇多糖；将醇沉出的滑菇多糖冷冻干燥，即得滑菇多糖提取物。

4.根据权利要求1所述的滑菇多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的纯化方法包括下述步骤：

(一)将粗滑菇多糖重新溶解在水中，加热到60℃并搅拌到溶解，得到粗滑菇多糖溶液；

(二)将粗滑菇多糖溶液直接上大孔吸附树脂，用乙醇洗脱，收集洗脱液；将洗脱液浓缩到原液体积的1/4-1/8；将洗脱液的浓缩液中加无水乙醇使得溶液中乙醇体积百分比浓度为75％，醇沉得到滑菇多糖；最后将沉淀出的滑菇多糖冷冻干燥，即得滑菇多糖提取物。

5.根据权利要求3或4所述的滑菇多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂是纤维素型大孔吸附树脂或聚苯乙烯型大孔吸附树脂。

6.根据权利要求1所述的滑菇多糖提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中超声提取30分钟时，每超声工作5秒，间歇1秒。