[发明专利]大黄鱼β-肌动蛋白启动子序列及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种启动子，尤其是涉及一种大黄鱼β-肌动蛋白(beta-actin)启动子序列及其应用。

背景技术

Beta-肌动蛋白的5’端调控序列(英文名Beta-actin 5’-regμlatory seqμence)。肌动蛋在真核生物中广泛存在，是构成肌小节和细胞骨架的主要成分([1]SHETERLINE P，SPARROWJ.Protein profile actin[M].London：London Academic Press。1994：1-62)。单体肌动蛋白为球蛋白，一般由375～377个氨基酸残基组成，分子量约为42000。肌动蛋白具有重要的生理功能，几乎参与了真核细胞的所有生理过程([2]WELCH M D。HOLTZMAN D A，DRMBIND G.The yeast actin cytoskcleton[J].Cμrr Opin Cell Biol，1994，6：110-119；[3]STAIGERC J，SCHLIWA M.Actin localization and fμnction in higher plants[J].Protoplasm，1987，141：1-2)，如细胞分裂、染色体运动、细胞器运动、细胞激化、胞质流动等。高等动物细胞内的肌动蛋白分为α，β，γ三类([4]MIWA T，MANABE Y，KMROKAWA K，et al.Strμctμre，chromasome location，and expression of the hμman smooth mμscle(enteric type)-γ-actin gene：evolμtion of six hμman actin genes[J].Mol Cell Biol，1991，11：3296-3306)。肌动蛋白非常保守，各种生物间氨基酸序列的同源性(Identity)高达70％以上([5]HM S.YAN L.Actin andeμkaryotic evolμtion[J].Acta Zoolngi—Ca Sinica.1999.45：440-447)，在鱼类中β-肌动蛋白的同原性更高。自20世纪80年代Perler建立了氨基酸取代与保守蛋白基因进化年代的线性关系后，β-肌动蛋白作为一种进化上的分子标记被广泛采用([6]PERLER F，EFSTRATIADIS A，LOMEDICO P，et al.The evolμtion of genes：the chicken preproinsμlin gene[J].Cell，1980，20：555-566；[7]HWANG G，RAHMAN M A，RAZAK s，et al.lsolation and characterization oftilapia β-actin promoter and comparison of its activity with carp β-actin promoter[J].BiochimieaBiophysiea Acta，2003，1625：11-18；[8]TAKAGI S，SASADO T，TAMIYA G，et al.An efficientexpression vector for transgenic medaka constrμction[J].Mol Mar Biol Bioteehnol，1994，3：192-199；[9]wμJ，LIM T，HE F.A discμssion aboμt the genesis and existing significance of intronsin animal genes[J].Acta Genefica Sinica，1998，25：409-415；[10]ZHOM R，LIM L，GMOY，et al.Similar gone strμctμre of two Soxga genes and their expression patterns dμring gonadaldifierenti·ation in a teleost fish，rice field eel(Monopterμs albμs)[J].Mol Reprod Dev，2003，66(3)：211-217)β-actin启动子序列能高效，稳定，广泛的启动活性。

发明内容

本发明的目的之一在于提供大黄鱼β-肌动蛋白启动子序列。

本发明的目的之二在于提供大黄鱼β-肌动蛋白启动子的克隆方法。

本发明的目的之三在于提供大黄鱼β-肌动蛋白启动子的应用。

本发明所述大黄鱼β-肌动蛋白启动子序列为：