[发明专利]一种葫芦巴碱的提取工艺

说明书

技术领域：

本发明属于天然药物提取领域，涉及一种胡芦巴碱的提取工艺。

背景技术：

胡芦巴碱(trigonelline，TRG)，

分子式：C₇H₇NO₂；分子量：137.14；

分子结构式：

胡芦巴为豆科植物胡芦巴Trigonella foenum-graecum L.的干燥成熟种子。具有温肾，祛寒，止痛的功用，性味苦，温，归肾经。用于肾脏虚冷，小腹冷痛，小肠疝气，寒湿脚气。

现代药理研究表明，胡芦巴具有抗糖尿病、降胆固醇及对急性化学性肝损伤的保护作用。胡芦巴碱为胡芦巴中的主要成分，具有抗肿瘤作用，在12.5mg/kg水平上能使白血病P-388小鼠声明延长31％。对动植物的细胞和组织有促使停止生长的作用。同时可治疗某些皮肤病，例如牛皮癣等。目前对胡芦巴的研究仅限于其胡芦巴碱含量测定方法及初步药理研究，胡芦巴药材的提取方法研究较少，刘广学等发表的“胡芦巴药材中胡芦巴碱的提取方法及其含量测定”文献中，考察以水、甲醇、无水乙醇及三种比例的甲醇-水为溶剂，用超声等方法的提取率，但考虑到大量甲醇对操作工人神经系统和血液系统的毒性影响，本发明人认为该方法不宜工业化。徐雅琴等发表的“超声波法提取南瓜果肉中胡芦巴碱最佳工艺的研究”，用50％乙醇在600W条件下超声提取15min，液料比为20ml/g，提取率较低，仅359.6μg/g。且从南瓜中提取胡芦巴碱成本较高，因南瓜粉中胡芦巴碱含量较低，为0.1219～0.4836mg/g(张英春，杨鑫，张华，等.高效液相色谱法测定南瓜粉中胡芦巴碱的含量.食品科学.2008，29(1)：280-282)，约为胡芦巴种子中胡芦巴碱含量的1/10。

发明内容：

本发明的目的是提供一种胡芦巴碱的提取工艺，本发明在浸泡过程同时采用超声波处理，利用氧化铝柱对胡芦巴碱吸附，使胡芦巴碱的提取率大大增加。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种胡芦巴碱的提取工艺，其特征在于包括以下步骤：

(1)将胡芦巴种子粉碎，放在氨醇溶液或含水乙醇中混合浸泡并同时进行超声波处理，浸泡后的混合溶液加热回流提取；

(2)将提取液浓缩至小体积后加入等体积的石油醚萃取，分2-6次萃取，弃去萃取液；

(3)将萃余液与2-5倍氧化铝拌样，烘干，通过氧化铝柱层析，用异丙醇或乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥；

(4)将干燥后的提取物用乙醇复溶，抽滤或离心，滤液或上清液减压回收乙醇，干燥即得胡芦巴碱。

步骤(1)所述粉碎设备是FWS350型风选式微粉碎机、BFM-6超低温超细高频振动式超微粉碎机或GZM型高频共振研磨机。

步骤(1)所述粉碎为原料粉碎粒度≤350目。

步骤(1)使用的氨醇溶液浓度为5-25％，含水醇溶液浓度为35-95％，加入量为原料按重量比计为1∶3-1∶16。

步骤(1)所述浸泡时间为0.5-5小时，使用的超声波频率为20-35kHz。

步骤(1)中回流提取时提取时间为1-3小时，提取次数2-4次。

步骤(2)中所述氧化铝为100-200目的中性氧化铝，所述氧化铝柱为常压短粗氧化铝柱，拌样、搅拌均匀于40-60℃烘干粉碎，过150-200目筛后装入层析柱。

本发明的提取方法先将原料微粉碎或超微粉碎，可将原料的大多数细胞壁打破，使细胞内的有效成分充分暴露，提高了得率；在浸泡过程中用超声波处理，直接影响药材的浸润速度和程度，进而影响成分的提取效果，并缩短提取时间，溶出杂质少，提高生产效率；氧化铝柱层析可以很好的分离纯化；乙醇复溶可进一步除杂，从而使胡芦巴碱的含量大幅度增加。

高效液相色谱法定量分析(参照赵怀清等发表的文献“高效液相色谱法测定胡芦巴中胡芦巴碱的含量”中的方法)：采用L-7110型高效液相色谱仪(日本日立公司)，L-7400型紫外检测器(日本日立公司)，江申色谱工作站。色谱柱为Asahipak NH-P-50(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-水(75∶25)；流速0.8mL/min；检测波长265nm；柱温室温。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：