[发明专利]含EB病毒膜蛋白gp350/220、gp85、gp78、gp25基因的重组腺病毒疫苗无效
申请号: | 201010202395.5 | 申请日: | 2010-06-13 |
公开(公告)号: | CN102108336A | 公开(公告)日: | 2011-06-29 |
发明(设计)人: | 曾益新;吕小斌;熊耿;谢彦博 | 申请(专利权)人: | 中山大学肿瘤防治中心 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N7/01;C12N15/38;C12N15/861;A61K39/245;A61K48/00;A61P31/20;A61P35/00;A61P11/02;C12R1/19;C12R1/93 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 张艳美;郝传鑫 |
地址: | 510060 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | eb 病毒 膜蛋白 gp350 220 gp85 gp78 gp25 基因 重组 疫苗 | ||
1.一种大肠杆菌菌株,其特征在于,该菌株的保藏名称为:大肠杆菌Escherichiacoli JM109/Pentr2B-gp350/220,保藏单位:中国典型培养物保藏中心,保藏日期:2009年1月29日,保藏号为:CCTCC NO:M2010030。
2.一种复制缺陷型重组腺病毒,其特征在于,该重组腺病毒为含EB病毒糖蛋白gp350/220编码基因的复制缺陷型腺病毒。
3.一种复制缺陷型重组腺病毒,其特征在于,该重组腺病毒为含EB病毒糖蛋白gp85编码基因的复制缺陷型腺病毒。
4.一种复制缺陷型重组腺病毒,其特征在于,该重组腺病毒为含EB病毒糖蛋白gp78编码基因的复制缺陷型腺病毒。
5.一种复制缺陷型重组腺病毒,其特征在于,该重组腺病毒为含EB病毒糖蛋白gp25编码基因的复制缺陷型腺病毒。
6.一种如权利要去2~5任一项所述的复制缺陷型重组腺病毒的制备方法,其特征在于,该方法包括:
(1)将编码EB病毒糖蛋白gp350/220、gp85、gp78或gp25的DNA序列克隆到适当的腺病毒穿梭质粒中;得到携带gp350/220、gp85、gp78或gp25的DNA编码序列的重组腺病毒穿梭质粒;
(2)通过转化大肠杆菌感受态细胞,将所述重组腺病毒穿梭质粒扩增;抽提适量的重组腺病毒穿梭质粒;
(3)通过限制性内切酶消化重组腺病毒穿梭质粒,回收含相关启动子序列、和gp350/220、gp85、gp78或gp25的全长cDNA序列的DNA片段,并将该片段 定向克隆到腺病毒骨架质粒中,得到重组腺病毒质粒;
(4)将步骤(3)所得到的重组腺病毒质粒导入适当的腺病毒包装细胞,得到复制缺陷型重组腺病毒。
7.如权利要求6所述的复制缺陷型重组腺病毒的制备方法,其特征在于,所述的腺病毒穿梭质粒是pENTR2B。
8.如权利要求6所述的复制缺陷型重组腺病毒的制备方法,其特征在于,所述的腺病毒骨架质粒pAD-CMV/DEST。
9.如权利要求6所述的复制缺陷型重组腺病毒的制备方法,其特征在于,所述的包装细胞是293细胞。
10.权利要2所述的复制缺陷型重组腺病毒在治疗和/或预防EB病毒相关鼻咽癌方面的用途。
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