[发明专利]一种耐热型家畜用疫苗的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种疫苗的制备方法，尤其是涉及一种耐热型家畜用疫苗的制备 方法。

背景技术

伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)是一种a-疱疹病毒，可引起多种家畜和野 生动物的伪狂犬病。除猪以外的其它动物表现为致死性感染，猪是PRV的天然宿 主和贮存宿主，呈流行性感染。成年猪常常表现为隐性感染和呼吸道症状，母猪流 产、产死胎和木乃伊胎，公猪表现为睾丸炎。仔猪表现出发热、昏迷和神经症状， 死亡率很高。因此，伪狂犬病是养猪业的一种重要繁殖障碍性传染病。

PRRS可引起猪群多系统病症，繁殖母猪感染可导致流产、早产、死胎、木乃 伊胎等严重的繁殖障碍，死胎率可达20％～60％；初生及断乳前仔猪呼吸困难及高 死亡率(可高达80％)；仔猪发生呼吸系统疾病，并易继发细菌或病毒感染如猪伪狂 犬病毒(PRV)、猪流感病毒(CPN)、猪圆环病毒2型(PCV 2)、猪呼吸道冠状病毒、 胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪链球菌(SS)、多发性巴氏杆菌((PM)、副猪嗜血杆菌 (HP＞等，死亡率增加，生长缓慢；育肥猪感染多数发病较为温和，但可造成饲料报 酬降低，生产性能下降；公猪感染可造成精液品质下降；猪只一旦感染PRRSV， 常可导致长期的病毒血症/持续感染而不断向外排毒，引起本病在猪群中反复爆发 而难以根除。目前PRRS已遍及全球主要养猪国家与地区，给养猪业带来惨重的经 济损失。PRRS目前已成为危害养猪业最严重的猪传染病之一。OIE及我国已将 该病列为B类/乙类/二类传染病”(List B disease)。

目前，弱毒活疫苗是预防畜禽传染病的主要疫苗之一，在我国动物用疫苗中， 活疫苗占相当大的比例。国内疫苗企业常用的保护剂主要是蔗糖、牛奶、明胶等， 组方简单，保护性能差。如果在2℃～8℃条件下，保存期只有3～6个月，多需要在 -15℃以下保存。而国内传统的动物用疫苗保护剂的研制相对滞后，使疫苗的长期 保存和长途运输受到很大限制，加上基层防疫部门缺乏必要的冷冻和冷藏设施，容 易因免疫失败而造成疫病流行。所以，耐热保护剂的研究非常急需，发达国家在二 十世纪八十年代就已开始进行耐热保护剂的研究，目前已经基本采用耐热冻干保护 剂生产冻干疫苗，但由于保护剂的研究和应用属于专利资料，处于保密状况中。

当前，进入中国市场的伪狂犬疫苗均是采用耐热保护剂冷冻的而成，存放温度 在2～8℃，存放时间甚至长达30个月，很好的保证了疫苗的使用效果。而我国的 伪狂犬活疫苗存放温度仍然是-15℃，进口疫苗对国产疫苗造成了巨大的市场冲击， 影响国内生物制品企业的发展。技术的落后也限制了国产疫苗海外市场的拓展，因 此，耐热型疫苗的研发势在必行。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种操作简单， 可以在2～8℃条件下保存，疫苗效价较好的耐热型家畜用疫苗的制备方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种耐热型家畜用疫苗的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)按照以下组分及含量(wt％)准备耐热保护剂原料：

明胶            1～3，

蔗糖            6～8，

牛血清白蛋白    1～3，

胰蛋白胨        2～3，

EDTA            1～3，

谷氨酸单钠      1～3，

磷酸氢二钾      1～2，

磷酸二氢钾      0.5～0.6，

双蒸水          余量；

(2)将明胶、蔗糖、EDTA、胰蛋白胨按比例溶于双蒸水中，控制温度为 108～121℃，灭菌15～30min，得到耐热组份；

(3)将牛血清白蛋白、谷氨酸单钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾按比例溶于剩 余的双蒸水中，经0.22μm的滤膜除菌得到不耐热组份，然后将不耐热组份与耐热 组份混合，得到疫苗耐热保护剂；