[发明专利]吴茱萸碱在制备抗对虾白斑综合症的制剂中的应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及吴茱萸碱(Evodiamine)在制备抗对虾白斑综合症的制剂中的应用。

(二)背景技术

对虾是热带亚热带浅海最占优势的甲壳动物。由于其种类多，种群数量大，繁殖力强，生长迅速，肉味鲜美，具有很高的经济价值。由于环境污染、养殖技术、疾病控制等方面的原因，对虾，特别是斑节对虾(Penaeus monodon)、南美白对虾(Penaeus vannamei)、中国对虾(Penaeuschinensis)和日本对虾(Marsupenaeus japonicus)等，极易受到病毒侵害，并造成大量损失。对虾白斑综合症病毒(White spot syndrome virus，WSSV)，是对虾养殖中为害最烈的最主要病原。充分利用对虾的先天性免疫系统和免疫机制，通过有针对性地刺激对虾的抗病机制来抵抗病毒，对于对虾病害的预防、治疗，提高对虾养殖的经济效益具有重要的意义。

对虾是最重要的海水养殖产品之一，但是自从1990年代以来，一直受到病害的严重威胁，尤其是对虾白斑综合症病毒(white spot syndromevirus，WSSV)是危害对虾养殖的最主要病原，其致病能力强，传播范围广，给世界对虾养殖业造成了巨大的损失，然而至今仍无有效的防治方法。

许多针对对虾病害的研究由于其仅仅停留在应用层面，并没有对所得到药物的抗病机制进行更加深入的探讨，因此其药物的应用受到了一定的限制。同时由于无法针对其作用机理进行分析，这些药物使用过程中产生的问题也得不到解答，进而无法有效解决。因此，研究已知药理的抗病药物十分必要。

对虾作为无脊椎动物的一员，主要通过其物理屏障、应激反应、先天性体液免疫、细胞生理调节等过程抵御病害。细胞凋亡作为清除衰老和异常细胞的主要机制，在对虾染病细胞的清除及防止病毒扩散中具有重要作用，是对虾抗病害的重要手段。并且是能够抵御病毒性侵害的重要武器。

Caspase蛋白家族中的两个亚家族分别在细胞凋亡中担任起始和效应蛋白，是细胞凋亡的关键蛋白。担任起始作用的caspase-8、9等，收到凋亡信号后，能通过自剪接而激活，然后引起caspase级联反应；担任效应作用的caspase-3、6、7等可直接降解胞内的结构蛋白和功能蛋白，引起凋亡。

(三)发明内容

本发明目的是提供吴茱萸碱(Evodiamine)在制备抗对虾白斑综合症的制剂中的应用。

本发明采用的技术方案是：

吴茱萸碱(Evodiamine)在制备抗对虾白斑综合症的制剂中的应用。

吴茱萸碱，提取自芸香科植物吴茱萸[Evodia rutaecarpa(Juss.)Benth.]及同属植物石虎[E.rutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang]的果实，CAS：518-17-2，结构式如下：

吴茱萸碱有健胃、镇痛、止干呕和止嗳酸等功效；有利尿作用；对大肠杆菌有强力的抑制作用；对猪蛔虫有显著杀虫作用；还有收缩子宫及升压作用；治疗早老性痴呆症及中风有一定疗效。本申请发明人发现该小分子可作用于对虾凋亡途径关键蛋白，因此可利用该小分子制备抗对虾白斑综合症的制剂，可极大地增强对虾对对虾白斑综合症(WSSV)的抵抗力，降低致死率。

所述吴茱萸碱可用于制备诱导PjCaspase蛋白活化的制剂。

优选的，所述制剂为肌肉注射剂，其中Evodiamine的注射剂量为1～5μg/g虾(优选3.5μg/g虾左右)。

本发明所述Evodiamine即作用于对虾凋亡途径关键蛋白PjCaspase的对虾抗白斑综合症相关小分子。通过直接注射Evodiamine或进行喂食可以通过激活PjCaspase蛋白的活性，加强对虾对病毒的抵抗，极大地增强对虾对对虾白斑综合症(WSSV)的抵抗力，降低致死率。

本发明的有益效果主要体现在：本发明所述Evodiamine可以有效诱导PjCaspase蛋白的活化，极大地增强对虾对对虾白斑综合症(WSSV)的抵抗力，降低致死率；由于Evodiamine是在人体中广泛使用的提高免疫力的药物，对人体没有毒性，使用Evodiamine的对虾，无论其是否将药物代谢完全都可以放心食用。

(四)附图说明

图1为Evodiamine在细胞内与Caspase蛋白结合能力的验证；

图2为Evodiamine对凋亡活性的影响；a为凋亡指标效应酶Caspase3的活性检测；b为凋亡指标TUNEL活性；