[发明专利]一种从蛹虫草中分离的叶黄素及其提取分离方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种叶黄素及其提取分离方法，尤其涉及一种从蛹虫草中分离的叶黄素及其提取分离方法。

背景技术：

人工蛹虫草Cordyceps militaris(Fr.)Link.又称北冬虫夏草，与冬虫夏草同属于麦角菌科虫草属。北方民间曾把蛹虫草作为冬虫夏草应用，《新华本草纲要》记载其“性平，味甘，有益肺肾，补精髓，止血化痰”，用于肺结核、老人虚弱和贫血等症，为珍贵的中药材，目前蛹虫草主要被开发作为具有滋补作用的药品和功能食品。近年来对人工蛹虫草化学成分研究多集中在核苷类物质、虫草多糖、虫草酸、甾醇等常见化合物，对其色素成分的研究还很有限，目前仅两篇文献报道蛹虫草中含有类胡萝卜素，但未纯化和结构鉴定。目前从其它物质中分离提取叶黄素的方法比较复杂，容易造成光、氧、热、酸对于叶黄素结构的破坏，分离的叶黄素纯度不高，回收率低，不适宜于工业化生产。

发明内容：

本发明的目的在于克服上述已有技术的不足而提供一种从蛹虫草中提取分离和纯化叶黄素的方法，其方法简单，分离的叶黄素纯度高，回收率高，具有抗氧化、延缓动脉硬化的作用，叶黄素结构不会被破坏，适宜于工业化生产。

本发明的目的可以通过如下措施来达到：一种从蛹虫草中分离的叶黄素，其特征在于该叶黄素通过采用石油醚脱脂，氯仿回流提取，硅胶柱色谱层析方法从蛹虫草中提取分离、纯化而得到，该叶黄素分子式：C₄₀H₅₆O₂，相对分子质量：568，为3，3′-二羟基-α-胡萝卜素，结构式为：

一种从蛹虫草中分离的叶黄素的提取分离方法，其特征在于其包括如下步骤：

A、将人工蛹虫草进行烘干粉碎，烘干温度为30-40℃，先用石油醚25℃-35℃(30℃)回流提取2-4次，每次提取7-9小时，再用氯仿50℃-60℃回流提取3-5次，每次提取7-9小时，合并氯仿提取液，30℃-40℃减压浓缩，得黑褐色浸膏；B、将该黑褐色浸膏按每次6g-10g分次进行硅胶柱色谱分离纯化：先将浸膏用8-12ml的氯仿和甲醇混合溶液溶解，氯仿和甲醇的体积比为1∶1，后拌以14g-22g硅胶后旋干，干法上样，硅胶装柱的高度为上样高度的4-6倍，用石油醚-醋酸乙酯(石油醚与醋酸乙酯的体积比2∶1-1.5)为流动相进行洗脱，自洗脱液出现颜色开始收集洗脱液，每份收集80-120mL，共收集20份，合并收集的第10-20份洗脱液，减压浓缩得洗脱物ZF-L；重复上述步骤，将洗脱物ZF-L按每次6g-10g分次进行硅胶柱色谱分离纯化，以石油醚-醋酸乙酯(石油醚-醋酸乙酯的体积比为5∶2-3)为流动相，ZF-L经硅胶柱色谱分离得洗脱物ZF-LA；再重复上述步骤，将洗脱物ZF-LA按每次6g-10g分次进行硅胶柱色谱分离纯化，以二氯甲烷-甲醇(二氯甲烷-甲醇体积比为50∶1-3)为流动相，最终得叶黄素ⅣL2。

为了进一步实现本发明的目的，所述的洗脱液采用棕色瓶收集。

为了进一步实现本发明的目的，所述的合并后的洗脱液低温浓缩后放于低温冰柜中避光存放。

本发明同已有技术相比可产生如下积极效果：本发明以蛹虫草为原料分离提取叶黄素，其方法简单，只需要用硅胶柱层析，进行吸附和洗脱，就能完成分离和纯化，适宜于工业化生产。其可以避免光、氧、热、酸对于叶黄素结构的破坏，本发明中分离得到的天然色素，是首次在虫草属真菌中发现，也是从蛹虫草中分离和鉴定的第一个色素，属于天然药物中化学成分的研究成果，具有抗氧化、延缓动脉硬化的作用。本发明中分离并鉴定的叶黄素，可为研究虫草属真菌中的功能天然色素和优化蛹虫草的人工栽培条件提供重要参考，还能为人工蛹虫草在更多方面的开发利用提供理论支撑。

具体实施方式：下面对本发明的具体实施方式作详细说明：