[发明专利]一种变构酸的制备方法

权利要求书

1.一种如式(I)所示的变构酸的制备方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中，配制成浓度为5000-50000μg/mL的变构霉素溶液，再将脂肪酶溶解于0.1-0.5M的缓冲液B中，配制成浓度为100-500U/mL的酶液；将酶液加入到变构霉素溶液中，并且变构霉素与脂肪酶活力之比为500-5000μg/U，于25-40℃下反应0.5-5.0h，反应结束，将反应液pH调至4.0，用等体积的萃取溶剂A萃取，分离出萃液层和水层；取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取，取有机层，用饱和盐水洗涤后再用Na₂SO₄干燥，真空蒸馏浓缩溶剂，得到变构酸粗品；将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂，经硅胶柱进行梯度洗脱，将收集到的洗脱液分别进行薄层层析，取含变构酸的柱层析产品，将得到的含变构酸的柱层析产品合并用丙酮重结晶，得到如式(I)所示的变构酸产品，

2.如权利要求1所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述缓冲液A与缓冲液B相同或不同，各自独立为下列之一：磷酸缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液。

3.如权利要求1所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述缓冲液A与缓冲液B均为磷酸缓冲液。

4.如权利要求3所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述磷酸缓冲液的浓度为0.2M。

5.如权利要求1所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述方法中将酶液加入到变构霉素溶液中时，使变构霉素与脂肪酶酶活力之比为1000-4000μg/U。

6.如权利要求1所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述反应温度为35℃，反应时间为3小时。

7.如权利要求1所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述萃取溶剂A为下列之一：乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙酸丁酯，苯。

8.如权利要求1所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述萃取溶剂B为下列之一：乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙酸丁酯，苯。

9.如权利要求1所述的变构酸的制备方法，其特征在于所述制备方法按如下步骤进行：(1)、将变构霉素溶解于0.2M的磷酸缓冲液中，配制成浓度为22.5mg/mL的变构霉素溶液，再将脂肪酶溶解于0.2M的磷酸缓冲液中，配制成配制成浓度为200U/mL的酶液；(2)、将酶液加入所述的变构霉素溶液中，并且变构霉素与脂肪酶酶活力之比为1000-4000μg/U，于35℃下反应3h；(3)、反应结束后，将反应液的pH调至4.0，用等体积的乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯；合并水层将pH调至2.0，用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，乙酸乙酯层用饱和食盐水洗涤后以Na₂SO₄干燥，真空浓缩，得到变构酸粗品；(4)、将所述变构酸粗品以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂，经硅胶柱层析，取含变构酸的柱层析产品，将得到的含变构酸的柱层析产品合并用丙酮重结晶，得到所述变构酸产品。