[发明专利]一种双醛羧甲基纤维素-胶原冷冻凝胶及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物医用材料的制备领域，具体而言，涉及一种具有良好的具有多孔性、亲水性、吸水保水性的双醛羧甲基纤维素—胶原冷冻凝胶及其制备方法。

背景技术

水凝胶是一种类似生命组织的高分子材料，由在水中不溶解但可溶胀的高分子网络及水组成，因而具有可成型性、吸湿性、成膜性、粘结性、热容量大等性能，广泛应用于生物支架、细胞培养、药物控释、组织工程和创伤、烧伤治疗及止血等生物医用领域，其中应用于组织工程的水凝胶主要分为两大类：合成高分子水凝胶和天然高分子水凝胶。

胶原是细胞外基质(ECM)的一种结构蛋白质，分子中至少应该有一个结构域具有α-链组成的三股螺旋构象(即胶原域)。胶原因为自身的特殊性质如低免疫原性、生物相容性、止血作用、可生物降解性和良好的细胞基质间相互作用，在生物医学领域有着十分广阔的应用前景。但是由于胶原自身机械性能和可塑性不足；热稳定性差，不能长期保存；对生物降解的耐受性较差，在体内降解过快，难以与新生组织的生长相匹配，其应用范围因不能满足某些生物医用材料的功能性需求而受到较大限制。因此，通常使用的胶原基生物材料都要经过物理或化学方法交联改性，以改善胶原的物化和生物学方面的性能。

常见的胶原改性方法主要有物理交联和化学交联。物理交联法主要有真空干热交联、辐射交联等。这类方法的特点是在交联过程中无需引入其他物质，也不会破坏胶原基材料的生物相容性，但是单纯的物理交联达不到所要求的交联度，而且过量或长时间的紫外线或γ射线辐照(CN1944495A)会导致胶原构象改变甚至使胶原降解。化学交联法应用较多的化学交联剂主要是戊二醛、碳化二亚胺类和双环氧类化合物。传统的纯化学交联法对于交联度的调控比较困难，不能满足再生速率不同的各种组织材料的要求，而以戊二醛(CN1387923A)做交联剂改性的胶原不会改变胶原的基本构象及基本生物学功能，但由于醛与胶原的反应过程可逆，生成schiff碱的结构不稳定，很容易在体内水解产生具有代谢毒性的游离小分子醛。

此外，常用的改性方法还有以胶原与其它天然高分子材料共混进行改性，如胶原—壳聚糖共混(CN1584150A)。虽然共混改性能够借助氢键等次价键改善胶原的强度，并增添了许多胶原不具有的优良性质，但是该方法改性的胶原在力学性能、热稳定性、抗酶降解性等方面仍然不能满足组织工程支架的要求。而以胶原与多糖衍生物共混是目前较好的一种改性方法，如双醛淀粉—胶原冷冻凝胶(CN101234216A)。双醛淀粉具有生物可降解性和低毒性，能够与胶原发生交联改性，有效的提高了胶原基材料的机械性能和热稳定性，且使用冷冻凝胶技术使制备的凝胶具有多孔性，利于细胞的吸附和生长。不过双醛淀粉的反应活性偏低，改性时用量偏大，在一定程度上降低了凝胶的生物相容性。

双醛羧甲基纤维素(CN101250827A)是以羧甲基纤维素钠为原料，采用高碘酸盐制备的新型高分子材料，具有无毒性、生物可降解性和生物相容性等优良的生物学性能，而且分子结构中含有大量的反应基团醛基，与胶原的反应活性高，因此可以在胶原基材料中做交联剂。目前为止，尚未有专利和文献对双醛羧甲基纤维素—胶原冷冻凝胶研究的报道。

发明内容

单纯的胶原凝胶力学性能差、热稳定性低和抗酶降解性能弱，不能满足材料的使用性能，而且传统改性方法会降低胶原凝胶生物相容性的特点，为此本发明提供了一种双醛羧甲基纤维素—胶原冷冻凝胶及其制备方法。

本发明通过以下技术方案实现，除特别说明外，所涉及的份数均为重量份数，百分比均为重量百分数：

一种双醛羧甲基纤维素—胶原冷冻凝胶及其制备方法，其特征是将质量分数为(1～3)％的胶原溶液和质量分数为(0.01～1)％的双醛羧甲基纤维素溶液混合均匀，然后注入模具中于—40～0℃贮藏1～7天，取出缓慢解冻即得到双醛羧甲基纤维素—胶原冷冻凝胶。

在上述技术案中，所述冷冻凝胶中双醛羧甲基纤维素和胶原的比例按干重计为1∶(100～10000)，优选范围为1∶(500～5000)。

在上述技术案中，所述胶原为从健康动物皮或腱中提取的，三股螺旋结构保持完好的胶原。

在上述技术案中，所述双醛羧甲基纤维素为以羧甲基纤维素钠为原料，采用高碘酸或高碘酸盐氧化制备，醛基含量为(30～92)％的双醛羧甲基纤维素。

在上述技术案中，所述混合溶液注入模具中于-25～-10℃贮藏3～7天。

在上述技术案中，所述冷冻凝胶可用于生物支架、细胞培养、药物控释、组织工程、创伤和烧伤治疗。