[发明专利]一种西伯利亚鲟卵子短期保存液及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明属水生生物卵子保存液及其制备和应用领域，特别是涉及一种一种西伯利亚鲟卵子短期保存液及其制备和应用。

背景技术

西伯利亚鲟是我国主要的经济水产养殖品种，具有生长速度快、适应性强、肉质好、鱼籽酱品质高等优点，自1996年首次引入国内以来，现已发展成为养殖产量仅次于施氏鲟的第二大鲟鱼养殖品种。

鱼类的卵子一经排出，其生存能力就会随时间的延长而迅速下降，卵子排出之后，选择和利用最佳保存时间对提高卵子的生存能力至关重要，排出的卵子必须在确定的时间内受精才能保证胚胎正常发育，如何提高鱼类卵子的生存能力在水产业的管理上显得越来越重要。西伯利亚鲟在人工催产的过程中常出现雄鱼排精和雌鱼排卵不同步的问题，如何实现卵子的短期保存，并保持较高的受精率和孵化率，是鲟鱼繁殖中所需解决的一个实际问题。光照、温度、氧气、保存液、pH等多种因素均会影响鱼类卵子短期保存的效果。有关鱼类卵子短期保存的研究，主要集中在鲑鳟鱼类、鲤形目鱼类，而关于利用保存液进行西伯利亚鲟卵子短期保存的技术，国内外尚未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种西伯利亚鲟卵子短期保存液及其制备和应用，该保存液实现了西伯利亚鲟卵子的短期保存，经保存后的卵子同样具有高达86.36％的受精率和94.74％孵化率及0％的畸形率，解决西伯利亚鲟雌雄催产效应时间不同步所带来的技术难题。

本发明的一种西伯利亚鲟卵子短期保存液，其组分包括：

NaCl：120mmol/L        葡萄糖：4.24mmol/L

KCl：5.67mmol/L        牛血清白蛋白BSA：1g/L

MgSO₄：0.78mmol/L      HEPES缓冲盐：20mmol/L

CaCl₂：0.65mmol/L      青霉素：20万IU/L

NaHCO₃：20mmol/L       链霉素：0.2g/L

pH值8.0。

本发明的一种西伯利亚鲟卵子短期保存液的制备，包括：

常温下，根据上述组分配制保存液，用1mmol/L的NaOH调节pH至8.0，即可。

本发明的一种西伯利亚鲟卵子短期保存液应用于西伯利亚鲟卵子的短期保存，具体保存方法如下：将西伯利亚鲟鱼的新鲜卵子完全浸泡于上述保存液中，于16℃下保存4h后，即可进行受精。

有益效果

本发明的西伯利亚鲟卵子短期保存液在适合的保存温度下，实现了西伯利亚鲟卵子的短期保存，经保存后的卵子同样具有高达86.36％的受精率和94.74％孵化率及0％的畸形率，解决西伯利亚鲟雌雄催产效应时间不同步所带来的技术难题。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1

保存液的配制

本发明所配制的保存液主要是模拟西伯利亚鲟自身体腔液的环境，体腔液是鱼类排卵过程中随卵子一起排出体外的液体，它主要由体腔上皮细胞和卵巢的分泌作用形成的，其生化成分与血液较为接近。通过测定10尾西伯利亚鲟体腔液的生化成分，确定本发明保存液的配方为：

氯化钠120毫摩尔/升，氯化钾5.67毫摩尔/升，硫酸镁0.78毫摩尔/升，氯化钙0.65毫摩尔/升，葡萄糖4.24毫摩尔/升，碳酸氢钠20毫摩尔/升，牛血清白蛋白1克/升，HEPES缓冲盐20毫摩尔/升，青霉素20万国际单位/升，链霉素0.2克/升，用1毫摩尔/升的氢氧化钠调节pH至8.0。

实施例2

最佳保存方法的确定

设定了2个保存温度：4℃、16℃及4个保存时间：4小时，8小时，16小时，24小时，共确定了8个不同保存条件的实验组。