[发明专利]一种近红外光谱测定丹参提取液中鞣质含量的方法

说明书

技术领域

本发明属中药生产质量监测方法，更具体地说涉及一种近红外光谱快速测定丹参提取液中鞣质含量的检测方法。

背景技术

鞣质是中药材中广泛存在的一类水溶性多元酚类化合物，具有沉淀蛋白的作用。鞣质在中药制剂中不仅会影响制剂的稳定性和澄明度，还可能会引起一系列严重的生理反应，例如，某些鞣质注入体内会引起黄疸和肝坏死等一系列临床症状。因此，鞣质在中药制剂过程中常作为杂质除去。近年来中药注射剂的安全性问题已引起人们的广泛关注，中药注射剂中鞣质能与血红蛋白形成药物性沉淀；局部组织多次注射可能导致组织坏死，造成无菌炎症。鞣质检查是中药注射剂的特殊检查项目之一。

丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)的干燥根及根茎，是我国传统医药学中应用最早且最广泛的药物之一，丹参注射液是国家基本医疗保险药品乙类品种，对治疗冠心病等心血管疾病具有较好的疗效。丹参注射液的生产流程包括提取、浓缩、醇沉等精制工序，各工序中的鞣质监测是丹参注射液生产质量控制的重要手段。

中国药典2005年版一部附录XB制定了以磷钼钨酸为显色剂，以没食子酸为对照品，以干酪素为吸附剂的鞣质含量测定法。该分析法操作繁琐、耗时。远不能满足对丹参注射液生产过程进行鞣质含量分析与监控的要求。因此，迫切需要建立简便、快速的丹参提取液鞣质含量检测方法，以满足生产企业对生产过程鞣质含量进行快速监测、优化控制的需求，从而保证最终产品质量。

近红外光谱(Near-Infrared Spectroscopy，NIRS)是可见光与中红外光谱之间波长范围为780nm～2526nm(12820cm^-1～3958cm^-1波数)的光谱区。该光谱区主要是含氢基团(C-H、N-H、O-H)的倍频与合频吸收。与其他光谱技术相比，近红外光谱具有吸收弱的特点，因此，使得样品不需要稀释等预处理，就可直接进行分析。该技术需要与化学计量学结合，其中，常用的化学计量学技术主要有主成分回归(PCR)和偏最小二乘回归(PLS)等。近红外光谱测量方法是一种较好的快速检测方法，可发展成为一种中药制剂生产过程在线检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种近红外光谱测定丹参提取液中鞣质含量的方法，可有效地解决丹参注射液生产过程中提取液鞣质含量快速测定的难点，以提高过程单元的精确控制，从而保证最终产品质量。

本发明的目的是通过如下技术方案实现：

1.校正集样本的收集：

收集不同批次丹参第1～3次提取过程中获取的丹参提取液样本；

2.校正集样本鞣质含量参照值的测定：

采用2005版中国药典附录XB中磷钼钨酸/干酪素法测定校正集样本鞣质含量，

(1)试剂、溶液配置：

磷钼钨酸试剂的配制 取Na₂WO₄ 100g，Na₂MoO₄ 25g，加水700ml使其溶解，加100ml HCl，50ml H₃PO₄，加热回流10h，放冷，再加150g Li₂SO4，50ml水和0.2ml溴水，煮沸约15min除去残留的Br，冷却，加水稀释至1000ml，过滤，即得，

对照品溶液的配制 精密称取没食子酸50mg，置100ml棕色量瓶中，加水溶解，定容，混匀后，精密吸取5.0ml置于50ml棕色量瓶中，加水定容，备用(每ml含没食子酸0.05mg)，

供试品溶液的配制 精密量取丹参提取液适量于棕色量瓶中，加水稀释15～35倍，摇匀，滤过，弃去初滤液，备用；

(2)标准曲线测定 分别精密量取对照品溶液0.5ml，1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml置于25ml棕色量瓶中，各加入磷钼钨酸试液1ml，再分别精密量取蒸馏水适量，补足体积至13ml，加29％碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录VA紫外一可见分光光度法，在760nm波长处测定吸光度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

(3)总酚含量测定 精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，加入磷钼钨酸试液1ml，加水10ml，用29％碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，以相应试剂为空白，在760nm波长处测定吸光度A，按标准曲线法计算总酚含量。