[发明专利]L-氨基酸生产菌以及L-氨基酸的生产方法

权利要求书

1.一种生产L-氨基酸的方法，其特征在于，在培养基中培养具有L-氨基酸生产能力、且经过了修饰从而携带具有选自下述(I)～(III)中的突变的突变型yeaS基因的属于肠肝菌科的细菌，并从该培养基收集L-氨基酸：

(I)在yeaS基因编码的蛋白质中，第28位的苏氨酸残基被苏氨酸以外的氨基酸所取代的突变，

(II)在yeaS基因编码的蛋白质中，第137位的苯丙氨酸残基被苯丙氨酸以外的氨基酸所取代的突变，

(1II)在yeaS基因编码的蛋白质中，第188位的亮氨酸残基被亮氨酸以外的氨基酸所取代的突变；

其中，没有所述突变的yeaS基因编码下述(A)或(B)中的任一种蛋白质：

(A)具有SEQ ID NO：2中所示的氨基酸序列的蛋白质，或

(B)具有在SEQ ID NO：2中所示的氨基酸序列中取代、缺失、插入或添加1～10个氨基酸而得到的氨基酸序列、且具有当在肠杆菌中的表达增强时使得L-半胱氨酸生产能力与非修饰株相比有所提高的活性的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，没有所述突变的yeaS基因为下述(a)或(b)的DNA：

(a)具有SEQ ID NO：1中所示的碱基序列的基因，或，

(b)与SEQ ID NO：1中所示的碱基序列的互补序列或能够由该互补序列制备的探针在严格条件下杂交、并且编码具有当在肠杆菌中的表达增强时使得L-半胱氨酸生产能力与非修饰株相比有所提高的活性的蛋白质的DNA。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述(I)～(III)的突变分别为下述(i)～(iii)的突变：

(i)第28位的苏氨酸残基被天冬酰胺所取代的突变，

(ii)第137位的苯丙氨酸残基被丝氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、组氨酸、半胱氨酸以及甘氨酸中的任一种所取代的突变，

(iii)第188位的亮氨酸残基被谷氨酰胺所取代的突变。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述细菌携带具有所述(ii)的突变的突变型yeaS基因，且在该基因编码的蛋白质中第137位的苯丙氨酸残基被丝氨酸或谷氨酰胺所取代。

5.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，所述L-氨基酸选自L-半胱氨酸、L-亮氨酸、L-苏氨酸、L-丝氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-缬氨酸、L-谷氨酸、L-精氨酸、L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸、L-脯氨酸。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述L-氨基酸为L-半胱氨酸。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述细菌经过修饰从而增强了L-半胱氨酸生物合成系统酶的活性。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述细菌经过修饰从而增强了丝氨酸乙酰转移酶活性。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其中，所述细菌携带降低了由L-半胱氨酸导致的反馈抑制的突变型丝氨酸乙酰转移酶。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的方法，其中，所述细菌为泛菌属细菌。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述细菌为Pantoea ananatis。

12.根据权利要求1～9中任一项所述的方法，其中，所述细菌为大肠杆菌。