[发明专利]一种制备β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶酶制剂的方法有效
申请号: | 201010110215.0 | 申请日: | 2010-02-20 |
公开(公告)号: | CN101845424A | 公开(公告)日: | 2010-09-29 |
发明(设计)人: | 谷海先;张伟;许建立;毕建成 | 申请(专利权)人: | 中诺生物科技发展江苏有限公司 |
主分类号: | C12N9/38 | 分类号: | C12N9/38;C12R1/84 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 224300 江苏省盐*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 半乳糖 水解 酶制剂 方法 | ||
1.一种制备酶制剂的方法,包括如下步骤:
1)将含目的酶的发酵液进行微孔膜过滤,得到含目的酶的澄清液;
2)将所述含目的酶的澄清液依次通过超滤柱组1和超滤柱组2,收集目的酶液;
所述超滤柱组1和所述超滤柱组2沿着含目的酶的澄清液的流动方向串联连接;所述超滤柱组1和超滤柱组2均至少含有一支超滤柱;
所述超滤柱由壁卷成;所述壁由至少二层超滤膜和至少一层导流网组成,超滤膜和导流网相间排列,每层导流网均夹设在两层超滤膜之间;所述含目的酶的澄清液沿所述导流网流动;
所述超滤柱组1中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为24密尔-46密尔,所述超滤柱组2中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为54密尔-86密尔;
3)向所述目的酶液中加入助剂,干燥,得到目的酶制剂;
所述步骤1)和步骤2)在密闭条件下进行。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述超滤柱组1中含有3支所述超滤柱,且3支所述超滤柱沿含目的酶的澄清液的流动方向串联连接;和所述超滤柱组2中含有3支所述超滤柱,且3支所述超滤柱沿含目的酶的澄清液的流动方向串联连接。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述超滤柱组1含有12支所述超滤柱,其中每3支沿含目的酶的澄清液的流动方向串联形成一小组,共形成4小组,4小组并联形成超滤柱组1;和所述超滤柱组2含有12支所述超滤柱,其中每3支沿含目的酶的澄清液的流动方向串联形成一小组,共形成4小组,4小组并联形成超滤柱组2。
4.根据权利要求1、2或3所述的方法,其特征在于:所述超滤柱组1中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为24密尔,所述超滤柱组2中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为54密尔;
或所述超滤柱组1中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为35密尔,所述超滤柱组2中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为60密尔;
或所述超滤柱组1中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为46密尔,所述超滤柱组2中的各超滤柱中的每层导流网的厚度均为86密尔。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:所述超滤柱组1中每支所述超滤柱中各层超滤膜的总面积为28m2-31m2,具体为30m2、32m2或28m2;所述超滤柱组2中每支所述超滤柱中各层超滤膜的总面积为24m2-27m2,具体为26m2、27m2或24m2。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:所述超滤柱组1中每支所述超滤柱和所述超滤柱组2中每支所述超滤柱均沿含目的酶澄清液的流动方向长0.5m或1m;所述超滤柱组1中每支所述超滤柱和所述超滤柱组2中每支所述超滤柱的横截面的外直径均为2英寸或8英寸;所述超滤柱组1中每支所述超滤柱的壁中和所述超滤柱组2中每支所述超滤柱的壁中的超滤膜均为3-4层、和导流网均为2-3层。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:所述超滤柱组1中每支所述超滤柱的平均通透量为40-52升/m2/h,具体为40升/m2/h、45升/m2/h或52升/m2/h;和所述超滤柱组2中每支所述超滤柱的平均通透量为30-35升/m2/h,具体为30升/m2/h、32升/m2/h或35升/m2/h;和所述超滤膜的截留分子量为1-3万道尔顿,优选为2万道尔顿。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:所述超滤膜带孔;和所述超滤膜的孔分布均匀;和所述超滤膜的孔径大小均一;和所述将含目的酶的澄清液直接依次通过超滤柱组1和超滤柱组2,在外界压力下进行;和外界压力大小恒定,外界压力大小为1Mpa。
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