[发明专利]用壳聚糖去除乳清浓缩蛋白中β-乳球蛋白及回收β-乳球蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及乳品加工领域，特别涉及对牛乳中主要过敏原β-乳球蛋白的去除及回收的方法。

背景技术

β-乳球蛋白(β-Lg)为牛乳中的主要过敏原，能引发婴儿的过敏反应。目前应用盐析、选择性沉淀、色谱技术和膜技术对β-Lg进行提取、纯化以及去除。但是制备色谱柱价格昂贵，一般为10000元～50000元，而且这些方法选择性差，在去除β-Lg的同时也去除了大部分的其他蛋白，采用纯化的方法所得乳清浓缩蛋白中β-Lg含量为纯化前的15％～46.7％，α-乳球蛋白(α-Lg)含量为纯化前的20％～40％，纯化法对β-Lg的去除率低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了解决现有方法成本较高、选择性差、对β-Lg的去除率低的问题，提供了一种用壳聚糖去除、回收乳清浓缩蛋白中β-乳球蛋白的方法。

本发明用壳聚糖去除乳清浓缩蛋白中β-乳球蛋白的方法如下：一、将WPC 80溶于超纯水中，得到浓度为0.01g/mL的WPC 80超纯水溶液，然后将浓度为10.0mg·mL^-1的壳聚糖溶液与WPC 80超纯水溶液混合，得到壳聚糖浓度为2.0mg·mL^-1的混合溶液；二、用浓度为1mol·L^-1的NaOH溶液调节混合溶液的pH值为6.7，然后静置10min，再以5000转/分钟的转速离心15min，得到复合沉淀和上清液；三、将上清液用截留分子量为8kDa～10kDa的透析袋透析过夜，然后在真空度为0.05Pa的条件下冻干12h，得到低含量β-乳球蛋白的乳清粉，即完成用壳聚糖去除乳清浓缩蛋白中的β-乳球蛋白。

本发明回收β-乳球蛋白的方法如下：一、将浓缩型乳清蛋白WPC 80溶于超纯水中，得到浓度为0.01g/mL的WPC 80超纯水溶液，然后将浓度为10.0mg·mL^-1的壳聚糖溶液与WPC80超纯水溶液混合，得到壳聚糖浓度为2.0mg·mL^-1的混合溶液；二、用浓度为1mol·L^-1的NaOH溶液调节混合溶液的pH值为6.7，然后静置10min，再以5000转/分钟的转速离心15min，得到复合沉淀和上清液；三、将步骤二所得复合沉淀与浓度为0.1mol·L^-1的乙酸溶液按照1∶15的体积比混合，然后用浓度为1mol·L^-1的NaOH溶液调节pH值为9.0，再磁力搅拌1分钟，得到混合液；四、在20℃的条件下以10000转/分钟的转速离心混合液20min，然后将离心后的上清液用截留分子量为8kDa～10kDa的透析袋透析过夜，再在真空度为0.05Pa的条件下冻干12h，即得含有β-乳球蛋白的乳清粉。

本发明方法对β-乳球蛋白的去除率为94.23％，同时α-La的保留率为78.68％，牛血清白蛋白(BSA)的保留率为35.41％，本发明方法操作简单，所用壳聚糖价格为8元/g，成本较低，适合大规模生产；采用本发明方法对β-Lg的回收率为87.23％，壳聚糖的回收率可96.50％。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式中用壳聚糖去除乳清浓缩蛋白中β-乳球蛋白的方法如下：一、将WPC 80溶于超纯水中，得到浓度为0.01g/mL的WPC 80超纯水溶液，然后将浓度为10.0mg·mL^-1的壳聚糖溶液与WPC 80超纯水溶液混合，得到壳聚糖浓度为2.0mg·mL^-1的混合溶液；二、用浓度为1mol·L^-1的NaOH溶液调节混合溶液的pH值为6.7，然后静置10min，再以5000转/分钟的转速离心15min，得到复合沉淀和上清液；三、将上清液用截留分子量为8kDa～10kDa的透析袋透析过夜，然后在真空度为0.05Pa的条件下冻干12h，得到低含量β-乳球蛋白的乳清粉，即完成用壳聚糖去除乳清浓缩蛋白中的β-乳球蛋白。

本实施方式中对β-乳球蛋白的去除率为94.23％，同时α-La的保留率为78.68％，牛血清白蛋白(BSA)的保留率为35.41％。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤三中所述透析袋的截留分子量为8.5kDa～9.5kDa。其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤三中所述透析袋的截留分子量为9kDa。其它与具体实施方式一相同。