[发明专利]一种壳聚糖固定化蒜氨酸酶及制备大蒜素方法

权利要求书

1.一种利用壳聚糖固定化蒜氨酸酶的方法，包括以下步骤：

a.壳聚糖微球的制备：将壳聚糖溶解在0.5％的醋酸溶液中，制成2％的壳聚糖溶液，用注射器将壳聚糖溶液滴加到含有10％的氢氧化钠、95％乙醇溶液中，制成2-3mm左右的壳聚糖微球，用蒸馏水洗至中性，保存在蒸馏水中备用；

b.壳聚糖的交联及微球载体的制备：取壳聚糖微球与0.5％-5％的戊二醛溶液反应30-60min，用无水乙醇清洗数次，再用蒸馏水洗涤3-5次，真空抽滤干燥，得到壳聚糖微球载体，在4℃冰箱中封闭保存备用；

c.蒜氨酸酶固定化：在4℃条件下，取制备好的壳聚糖微球载体加入一定量的蒜氨酸酶溶液中，中速摇床振荡3-10h，取出后用蒸馏水洗去残留的壳聚糖微球表面的酶，至冲洗液中无酶活性检出，真空抽滤干燥，即得到固定化蒜氨酸酶，将此固定化酶浸于0.1mol/L pH为6.5的磷酸缓冲液中，在4℃保存备用；

2.一种利用壳聚糖固定化蒜氨酸酶制备大蒜素的方法，其特征在于将权利要求1所述制备方法制备得到的固定化蒜氨酸酶固定于生物流化床反应器内连续循环式利用固定化蒜氨酸酶催化底物转化生成大蒜素。