[发明专利]表达插入痘病毒基因组中的同源基因的重组痘病毒

权利要求书

1.一种重组修饰痘苗Ankara(MVA)病毒，至少包含两段具有至少50％同源性的同源序列，其中每一个所述序列插入到所述病毒基因组的不同插入位点。

2.一种重组MVA病毒，至少包含两段同源序列，所述序列之间具有至少60％的同源性。

3.根据权利要求1或2的重组MVA病毒，其中所述序列之间具有65-75％的同源性。

4.根据权利要求1至3任一项的重组MVA病毒，其中所述序列为同源基因。

5.根据权利要求4的重组MVA病毒，其中所述同源基因来源于黄病毒。

6.根据权利要求5的重组MVA病毒，其中所述黄病毒是登革病毒。

7.根据权利要求5或6的重组MVA病毒，其中所述基因是至少两个来源于所述病毒至少两个不同血清型的同源基因。

8.根据权利要求5-7任一项的重组MVA病毒，其中所述基因是至少两个PrM基因。

9.根据权利要求8的重组MVA病毒，其中所述基因是4个PrM基因。

10.根据权利要求4-9任一项的重组MVA病毒，其中所述同源基因每一个均受到相同启动子的转录调控。

11.根据权利要求10的重组MVA病毒，其中所述同源基因每一个均受到所述痘苗病毒早期/晚期启动子p7.5的转录调控。

12.根据权利要求1-11任一项的重组MVA病毒，其中用于形成所述重组病毒的所述MVA为如保藏于欧洲动物细胞培养物保藏中心(ECACC)、保藏号为V00083008的MVA-BN。

13.根据权利要求1-12任一项的重组MVA病毒，其中所述MVA在哺乳动物细胞中属于复制缺陷型或不能复制。

14.根据权利要求13所述的重组MVA病毒，其中所述哺乳动物细胞为人细胞。

15.根据权利要求1-14任一项的重组MVA病毒，其中所述序列插入到所述MVA病毒基因组中的天然存在的缺失位点和/或间隔区。

16.一种疫苗，包含根据权利要求1至15任一项的重组MVA病毒。

17.一种药物组合物，包含根据权利要求1至15任一项的重组MVA病毒和药物学可接受载体、稀释剂、佐剂和/或添加剂。

18.根据权利要求1至15任一项的重组MVA病毒在制备药物中的应用。

19.根据权利要求1-15任一项的重组MVA病毒、根据权利要求16的疫苗或权利要求17的组合物在制备影响活体动物的免疫反应的药物中的用途。

20.根据权利要求19的用途，其中所述活体动物为人。

21.根据权利要求1-15任一项的重组MVA病毒、根据权利要求16的疫苗或权利要求17的组合物在制备诱导活体动物的免疫反应的药物中的用途。

22.根据权利要求21的用途，其中所述活体动物为人。

23.包含有根据权利要求1-15任一项所述的重组MVA病毒的细胞。

24.一种产生权利要求1-15任一项所述的重组MVA病毒的方法，包括如下步骤：

-用MVA病毒感染细胞；

-用第一载体构建体转染被感染细胞，其中第一载体构建体包含待引入到所述MVA病毒的基因组中的序列和能够指导待插入到所述MVA病毒基因组中的插入位点的所述序列的整合的MVA病毒基因组序列；

-鉴定和分离所产生的重组MVA病毒；

-用上述感染所述细胞的步骤所获得的重组MVA病毒和另一载体构建体重复上述步骤，所述另一载体构建体包含有另外的待引入到所述MVA病毒基因组中的序列，所述序列与第一载体构建体的所述序列是同源的。

25.权利要求24的方法，还包括纯化所形成的重组MVA病毒的步骤。