[发明专利]一种从桑叶中连续提取分离1-脱氧野尻霉素(DNJ)、黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从桑叶中连续提取分离1-脱氧野尻霉素(DNJ)、黄酮的方法。

背景技术

桑叶为桑科植物桑的干燥叶，栽培或野生，对土壤适应性强，全国大部分地区多有 生产。味苦、甘，性寒。经研究发现，桑叶在药理上具有抗炎、降血糖作用，并能够降 血脂、利尿。桑叶具有上述活性和药理学作用，主要是因为其组分中含有1-脱氧野尻霉 素(DNJ)、黄酮等成分，因而将其从桑叶中提取出来以供集中使用是十分有必要的。

1-脱氧野尻霉素(DNJ)是一种强的α-葡萄糖苷酶抑制剂，抑制小肠中的α-葡萄糖苷酶 将人体从淀粉类食物中所分解来的蔗糖、麦芽糖等二糖分解成葡萄糖，能明显抑制食后血糖 急剧上升；黄酮类化合物是一类天然抗氧化剂，能够清除人体中超氧化自由基和过氧化物， 具有软化毛细血管，改善血液循环系统的功能；1-脱氧野尻霉素(DNJ)和桑叶黄酮协同作用 能更有效抑制血糖上升，防治糖尿病及其并发的心脑血管疾病。

目前国内外对从桑叶中提取并分离1-脱氧野霉素(DNJ)、黄酮进行了一些研究。

中国专利200710060127.2公开了一种从桑叶中提取生物碱、黄酮和多糖活性成分的方 法，其主要步骤为将干燥后的桑叶浸泡入乙醇或丙酮中后减压蒸发，并加入水后通过大孔树 脂用乙醇或丙酮洗脱，减压蒸发得到黄酮类化合物浸膏，再通过阳、阴离子交换树脂后先用 氨水后用水洗脱离子柱，然后减压蒸发得到生物碱浸膏。该方法不足之处在于，料液分离采 用高速离心机，在工业上成本较高；另外先使料液通过大孔树脂分离黄酮，后过阳离子树脂 提取生物碱，容易丢失贵重而含量又相对较低的活性成分1-脱氧野霉素(DNJ)(桑叶中含 0.2％-0.4％)。

中国专利200810236144.1公开了另一种提取方法，将桑叶加入盐酸-乙醇-水溶液后获得 粗提物，并通过大孔吸附树脂再分别用水、乙醇、盐酸溶液提取并浓缩成粉末，其具有条件 温和，可重复使用的优点。但其不足之处在于，该工艺在制备生物碱时使用氯仿、正己烷等 有机溶剂，有毒，且难以从产品中清除，而且不适合大规模工业生产。

中国专利200710067498.3公开了一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，其主要原 理为，将原料桑叶粉碎后用溶剂提取所需组分，再将其酸化后通过阳离子交换树脂，并用醇 溶液洗脱后将洗脱液浓缩成浸膏即可得到相应提取物。其好处为，可简单的获得所分离产品， 但缺点在于其生产步骤需要将提取液冷到10℃～-30℃，条件较为苛刻，而且该工艺中用到 甲醇、二乙胺、三乙胺等有毒、易燃的有机溶剂，不利于清洁生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种从桑叶中连续提取分离1-脱氧野尻霉素(DNJ)、黄酮的方法， 该方法提高了产品品质，并便于工业化生产。

本发明所述的方法由以下步骤组成：

(a)将桑叶和40～80％的乙醇按料液比1∶6～40投料，混合后于50～70℃搅拌1～ 3h，离心过滤得到滤液A；

(b)滤渣按料液比1∶6～40加入40～80％的乙醇，混合后于50～70℃搅拌1～3h， 离心过滤得到滤液B，合并滤液A和B，在50～70℃下减压浓缩制得浓缩液， 同时减压回收乙醇；

(c)浓缩液按絮凝剂的使用方法加入絮凝剂进行絮凝沉淀；

(d)压滤除去沉淀，滤液加入连通的多个阳离子交换树脂柱，并流经与该树脂柱串 连在一起的大孔吸附树脂柱；

(e)滤液加入结束后用纯净水洗，待大孔树脂柱流出液无色时，将其断开，再用0.1～ 0.5mol/L的氨水或含氨0.1～0.5mol/L的5％～50％乙醇溶液从阳离子树脂柱上 洗脱1-脱氧野尻霉素(DNJ)，将洗脱液用酸调节pH至3～5，再上阳离子树脂 柱，待洗脱液上完后，用纯净水洗至流出液无色，再用10％～70％的乙醇溶液洗；

(f)乙醇洗涤后，用纯净水洗至流出液无乙醇味，再用0.1～0.5mo l/L的氨水或含 氨0.1～0.5mol/L的5％～50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，用80D纳滤膜浓缩 并滤除氨等小分子杂质，浓缩液喷雾干燥，得棕黄色粉末状1-脱氧野尻霉素 (DNJ)；

(g)在步骤(e)中断开的大孔树脂柱用3％～10％的乙醇洗涤以除去胶性杂质，再用 50％～70％乙醇洗脱黄酮，收集棕红色洗脱液，减压浓缩回收乙醇，浓缩液喷雾 干燥，得黄棕色粉末状桑叶总黄酮。