[发明专利]一种吴茱萸的组织培养法

权利要求书

1.一种吴茱萸的组织培养法，其特征是依次包括以下步骤：

1)、取无病斑、生长健壮的吴茱萸嫩芽进行流水冲洗；

2)、将上述流水冲洗后的吴茱萸嫩芽经常规消毒，然后切成0.5～1.0cm长的小段嫩芽I， 将上述小段嫩芽I接种到诱导不定芽培养基上进行培养；培养条件为：16小时光照，光照强 度30～40μmol m^-2.s^-1，温度为26～28℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养 交替进行；

所述诱导不定芽培养基为：MS基本培养基+BA 0.5～1.0mg/l+IBA 0.1～0.5mg/l+糖20～30 g/l+琼脂5～9g/l，pH为5.5～6.0；

3)、待小段嫩芽I上长出的不定芽长至2.0～3.0cm高的小苗I时，割取小苗I；将此小苗 I切成0.5～1.2cm长的茎段I，将上述茎段I接种到增殖培养基上进行培养；培养条件为：16 小时光照，光照强度30～40μmol m^-2.s^-1，温度为26～28℃；8小时暗培养，温度为20～22℃； 上述光照和暗培养交替进行；

4)、待茎段I上长出的不定芽长至2.0～5.0cm高的小苗II时，割取小苗II；将此小苗II切 成0.8～1.2cm长的茎段II，将上述茎段II接种到增殖培养基上进行培养；培养条件为：16小时 光照，光照强度30～40μmol m^-2.s^-1，温度为26～28℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述 光照和暗培养交替进行；

所述步骤3)和步骤4)中的增殖培养基均为：MS基本培养基+BA 0.3～1.0mg/l+IBA 0.1～0.3mg/l+糖20～30g/l+琼脂5～9g/l，pH为5.5～6.0；

5)、待茎段II上长出的不定芽长至3.0～5.0cm高的小苗III时，割取小苗III；将此小苗III接 种到生根培养基中；

所述生根培养基为：1/2MS基本培养基+NAA 0.2～0.5mg/l+糖30g/l+琼脂5～9g/l，pH为 5.5～6.0；

6)、待上述小苗III长出大于2cm的至少3条根时，得可出瓶种植的种苗。

2.根据权利要求1所述的吴茱萸的组织培养法，其特征是：所述步骤1)为：将吴茱萸 嫩芽放入烧杯中，自来水冲洗1～2小时。