[发明专利]高温放线糖莱斯菌RHA1菌株产α-淀粉酶及其纯化方法无效
| 申请号： | 200910094648.9 | 申请日： | 2009-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN101619301A | 公开（公告）日： | 2010-01-06 |
| 发明（设计）人： | 林连兵;魏云林;季秀玲;井申荣;李秋鹏;洪伟;陈波;陆月情;熊学权 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N9/28;C12R1/01 |
| 代理公司： | 昆明今威专利代理有限公司 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650093云南省昆明市*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高温 放线 糖莱斯菌 rha1 菌株 淀粉酶 及其 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种高温放线糖莱斯菌(Laceyella sacchari)RHA1菌株，保藏号为：CGMCC No.2639，其具有产生α-淀粉酶的能力。
2.一种利用权利要求1所述的RHA1菌株纯化α-淀粉酶的方法，包括：
(1)超滤浓缩：高温放线糖莱斯菌RHA1菌株的发酵培养条件为温度50℃，PH7.5，培养时间16-18小时，将发酵液离心，取上清液，利用10KDa的超滤膜包进行超滤浓缩；
(2)硫酸铵沉淀：浓缩后液体加硫酸铵至40％的饱和度，离心取上清，继续加硫酸铵至60％的饱和度，离心弃上清，沉淀最后用PH7.0的磷酸盐缓冲液溶解，制成粗酶液；
(3)Superdex 75 10/300凝胶过滤层析：将获得的粗酶液离心，上清进行浓缩，上样于用50mM，PH7.0的磷酸盐缓冲液预平衡过的Superdex 75 10/300凝胶过滤层析柱，洗脱，收集酶活性部分，即为α-淀粉酶纯酶。
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