[发明专利]一种免疫耐受型树突状细胞及其制备方法与专用培养基有效
申请号: | 200910080952.8 | 申请日: | 2009-03-30 |
公开(公告)号: | CN101514333A | 公开(公告)日: | 2009-08-26 |
发明(设计)人: | 张毅;苏永锋;江小霞;霍思维;刘元林;吴英;毛宁 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08;A61K35/44;A61K39/00;A61P29/00;A61P37/02 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 免疫 耐受 树突 细胞 及其 制备 方法 专用 培养基 | ||
1.一种免疫耐受型树突状细胞的培养基,是在树突状细胞的培养基中加入作为 滋养层的间充质干细胞;
所述树突状细胞的培养基是:含有5%-15%(体积百分含量)胎牛血清的DMEM-LG 培养基。
2.如权利要求1所述的免疫耐受型树突状细胞的培养基,其特征在于:所述间 充质干细胞来源于商业化的人间充质干细胞株系。
3.一种免疫耐受型树突状细胞的制备方法,其特征在于:是往权利要求1或2 所述的免疫耐受型树突状细胞的培养基中,加入树突状细胞的前体细胞和诱导因子, 来制备免疫耐受型树突状细胞;
所述间充质干细胞与树突状细胞的前体细胞共培养比例是(1-2)∶(1-10);
所述诱导因子为GM-CSF、TNF-α、IL-4和LPS;
所述GM-CSF的浓度为10ng-100ng/ml;所述TNF-α的浓度为10ng-100ng/ml;所 述IL-4的浓度为10ng-100ng/ml;所述LPS的浓度为10ng-1000ng/ml;其中,GM-CSF 和TNF-α是在加入树突状细胞的前体细胞的第1天加入培养基,IL-4在第6天加入 培养基,LPS在第12天加入培养基。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述间充质干细胞与树突状细 胞的前体细胞共培养比例是1∶1。
5.如权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于:所述树突状细胞的前体细 胞来自人脐血或商业化的树突状细胞的前体细胞株系;所述树突状细胞的前体细胞为 CD34+细胞。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述GM-CSF的浓度为10-30ng/ml; 所述TNF-α的浓度为10-30ng/ml;所述IL-4的浓度为10-30ng/ml;所述LPS的浓度 为100-1000ng/ml。
7.权利要求3-6任一所述的制备方法所获得的免疫耐受型树突状细胞。
8.权利要求7所述的免疫耐受型树突状细胞在制备机体免疫耐受药物中的应用。
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