[发明专利]一种降血脂及调节肠道菌群的益生菌制剂的制备方法

说明书

发明领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种降血脂及调节肠道菌群的益生菌制剂的制备方法。

背景技术

心血管疾病是一类严重危害健康的疾病。近年来，随着社会的进步和人民生活水平的日益提高以及工作节奏的不断加快，心血管疾病已逐渐成为人类健康的头号杀手。心血管疾病与血脂升高、缺少运动、压力过大、家族心血管疾病史等相关，其中血脂升高，是造成胆固醇升高的主要因素之一。目前，对血脂高的控制主要是以含洛伐他汀类的药物为主，该药物具有严重的毒副作用，容易造成如肌痛、头痛、转氨酶升高、胃肠道不适、血脂紊乱、肝肾功能损害等。

“益生菌”是机体补充摄入的具有活性的微生物，可有效改善肠道菌群的平衡，对宿主产生良好的健康效应，具有防止腹泻、提高机体免疫力、降低血清胆固醇、血压、抗癌等生理功能。Kefir粒作为重要的益生菌源，在欧州许多国家，早已被广泛地应用来预防和治疗肠易激综合症、溃疡性结肠炎、便秘等胃肠消化代谢、降血脂等生理疾病。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种天然、安全，既能降血脂又可以调节肠道菌群的益生菌制剂的制备方法。

本发明实现目的的技术方案是：

一种降血脂及调节肠道菌群的益生菌制剂的制备方法，制备方法的步骤如下：

(1)将Kefir源植物乳杆菌MA2进行高密度培养，得到发酵液，其菌体密度不小于10⁸cfu/mL；

(2)上述发酵液经离心收集获得菌体，加入保护剂，冻干成菌粉；

(3)在冻干的菌粉中加入低聚糖混合物，混合均匀即得益生菌制剂成品。

而且，所述保护剂用量为菌体重量的3倍。

而且，所述保护剂的构成及其质量百分比分别为：10％的脱脂奶95％、海藻糖1.5％、甘油0.5％、山梨醇2％、麦芽糊精1％。

而且，所述低聚糖混合物的构成及其在菌粉中加入量分别为：低聚葡萄糖0.2％、菊粉0.3％、低聚果糖0.2％。

而且，所述益生菌制剂成品包含的MA2的活菌数不少于1.0×10¹⁰cfu/g。

而且，所述Kefir源植物乳杆菌MA2已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保存编号为CGMCC 3005。

本发明的优点和积极效果是：

本发明所制备的益生菌制剂在降血脂的同时还具有调节肠道菌群的生理功能，可以治疗和预防高血脂症状和调节肠道菌群，且无毒，安全，保存期长，可制成胶囊、微胶囊、冲剂、片剂等。

附图说明

图1为本发明植物乳杆菌MA2在MRS(●)及MRS-CHO培养基中的生长曲线(■)，及胆固醇的降解率(▲)。

图2饲喂高脂饲料的大鼠粪便中菌群的测定结果。其中：A组，高胆固醇饲料(▲)；B组，高胆固醇饲料+植物乳杆菌MA2(●)；a.大肠杆菌b.乳酸菌c.双歧杆菌。试验结果表示为：平均值(SD)(n＝10)

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。

一、Kefir源植物乳杆菌Lactobacillusplantarum MA2的筛选及生理功能测定

1、Kefir源植物乳杆菌Lactobacillusplantarum MA2的筛选：

(1)kefir粒中益生乳酸菌的筛选：

将西藏kefir粒，加一定量的生理盐水于灭菌研钵中研磨破碎，用无菌生理盐水作适当稀释后，取100μL分别涂布在MRS固体培养基，30℃厌氧培养48h，观察并记录菌落特征并挑取不同形态单个菌落，再分别划线接种于MRS上，重复几次纯化乳酸菌，得到乳酸菌纯菌株，然后进行革兰氏染色和过氧化氢试验，对具有革兰氏染色阳性和过氧化氢试验阴性的菌株进行斜面保藏。

(2)降胆固醇益生乳酸菌的初筛：

将kefir粒中筛选出的各乳酸菌菌株，按4％接种量分别接种于含的胆固醇的MRS液体培养基(MRS-CHO)中，在37℃下厌氧培养24h后，利用临苯二甲醛的方法测上清液中的胆固醇含量，计算胆固醇降解率。以不接菌的含胆固醇的MRS液体培养基作为对照。选取胆固醇降解率高的乳酸菌作为进一步的复筛菌株。

胆固醇的降解率(％)＝接菌的MRS培养基中上清液中胆固醇含量/未接菌的MRS培养基中上清液中胆固醇含量(对照组)×100％

(3)降胆固醇益生乳酸菌的复筛