[发明专利]复合酶法辅助醇提辣椒素的工艺方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种天然产物的提取方法，特别涉及一种复合酶法辅助醇提辣椒素的工艺方法。

背景技术：

辣椒素传统方法一般为乙醇回流提取法、丙酮浸提法等。由于辣椒具有片状凹凸不平的纤维组织结构，辣椒素及其他脂溶性成分存在于纤维组织内，采用传统的有机溶剂提取法需要耗费大量有机溶剂和时间，提取效率较低。超声法、超临界流体萃取法等认为是天然产物提取的新方法，在辣椒素提取的研究中认为是有效的，与传统方式比较具有产率高、生产周期短、无需加热、有效成分不被破坏等优点，但由于这些方法设备要求高、生产成本高等原因目前仅应用于试验研究中，难适用于大工业生产。

发明内容：

本发明的目的就在于克服上述现有技术中存在的不足，而提供一种复合酶法辅助醇提辣椒素的工艺方法，该方法利用纤维素酶和果胶酶复合处理辣椒粉后，再用乙醇法提取辣椒素，辣椒素的提取效率明显优于不添加酶处理的乙醇提取法，可全部将辣椒素提完。

本发明的技术方案是：一种复合酶法辅助醇提辣椒素的工艺方法，其特征在于：首先在辣椒粉中加入纯净水，然后将辣椒粉进行复合酶的酶解反应，抽滤；滤液用食用乙醇定容后备用，辣椒残渣用95％食用乙醇回流提取辣椒素。

上述辣椒粉中加入10倍质量体积的纯净水。

上述复合酶由果胶酶和纤维素酶按1∶1的比例组合。

上述辣椒粉的酶解工艺条件为：干辣椒质量体积比为10％时，复合酶酶用量为6-8mg/g辣椒，酶解温度为30-40℃，酶解液初始pH为4-6，酶解时间为1.8-2.2h。

上述辣椒粉的最佳酶解工艺条件为：干辣椒质量体积比为10％时，复合酶酶用量为8mg/g辣椒，酶解温度为40℃，酶解液初始pH为5.5，酶解时间为2h。

上述乙醇提取条件为：95％乙醇浓度、提取温度为50℃、料液比为1∶11、提取时间为1.5h，提取液过滤，提取液用乙醇定容备用，分光光度法检测辣椒素含量。

本发明的优点是：1、本发明以纤维素酶和果胶酶按1∶1复合处理辣椒粉后，再用乙醇法提取辣椒素的总提取率比乙醇直接提取的提取率高19.1％，可全部将辣椒素提完，并且减少了有机溶剂的用量和提取时间。2、对设备要求不高、降低了生产成本、适合大工业生产。

附图说明：

图1是酶解液pH值对辣椒素产量的影响的示意图。

图2是酶解温度对辣椒素产量的影响的示意图。

图3是酶用量对辣椒素产量的影响的示意图。

图4是酶解时间对辣椒素产量的影响的示意图。

图5是因素水平正交试验表

图6是本发明与未酶解乙醇提取法辣椒素提取率的对照试验表。

具体实施方式：

1材料与方法。

1.1材料与仪器。

朝天椒(天津市兰氏调味品有限公司)。辣椒素对照品(中国生物制品有限公司)，食用级乙醇(市售)，其它化学试剂均为分析纯试剂。复合酶由果胶酶和纤维素酶按1∶1组合(湖南尤特尔生化有限公司)。

LC-IOATVP高效液相色谱仪日本岛津公司)；UV一7220型紫外分光光度计(北京瑞利公司)。

1.2试验方法。

1.2.1辣椒素含量的测定-分光光度法。

标准溶液配制：准确称取辣椒碱纯品0.1000g于100mL容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，得辣椒碱标准溶液贮备液。用移液管准确移10.00mL标准溶液于100mL容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，得辣椒碱标准溶液(100μg/mL)。

磷钨酸钼试液的配制：取钨酸钠10g与磷钼酸2.4g，加水70mL与磷酸5mL，回流煮沸2小时，放冷，加水稀释至100mL，摇匀，即得。本液应置棕色玻璃瓶内，在暗处保存。

标准曲线绘制：分别吸取辣椒碱标准溶液0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00mL于50mL容量瓶中，再依次加入0.1mol/L氢氧化钠溶液9.50、9.00、8.00、6.00、4.00和2.00mL，然后，在各容量瓶中依次加入5mL磷钨酸-磷钼酸溶液，振摇均匀后，再加入约30mL饱和碳酸钠溶液，充分振荡至有白色沉淀生成，用饱和碳酸钠溶液定容至50mL刻度，摇匀后静置2h。将显色液离心分离沉淀物。以试剂空白调零，在660nm波长处用1cm比色皿进行测定，以辣椒碱浓度(X)为横坐标，吸光度(Y)为纵坐标，得标准曲线如下：

Y＝0.0226X+0.0084，R²＝0.999。