[发明专利]一种透明质酸与琼脂糖凝胶连接的方法有效
| 申请号： | 200910067914.9 | 申请日： | 2009-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN101591441A | 公开（公告）日： | 2009-12-02 |
| 发明（设计）人： | 董全文 | 申请（专利权）人： | 协和生物制药（天津）有限公司 |
| 主分类号： | C08G81/00 | 分类号： | C08G81/00;C08B37/08;C08B37/12 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300457天津市开*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 透明 琼脂 凝胶 连接 方法 | ||
1.一种透明质酸与琼脂糖凝胶Sepharose 4B连接的方法，其特征在于包含以下步骤：
A：透明质酸与己二酸二酰肼合成透明质酸-己二酸二酰肼衍生物；
B：用高碘酸钠对琼脂糖凝胶Sepharose 4B进行活化，得到含有醛基的琼脂糖凝胶Sepharose 4B；
C：将透明质酸-己二酸二酰肼与含有醛基的琼脂糖凝胶Sepharose 4B进行反应，用硼氢化钠还原，得到透明质酸与琼脂糖凝胶Sepharose 4B连接物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于透明质酸-己二酸二酰肼衍生物的制备过程是：将透明质酸溶于双蒸水中，加入10倍透明质酸质量的己二酸二酰肼，搅拌，用0.1M的HCl调节pH值4.0-5.5，加入5倍透明质酸质量的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，用0.1M的HCl调节pH值，使之维持在4.0-5.5，反应2小时，用1M的NaOH调节pH值至7.0，将反应后产物用双蒸水透析，透析后冷冻干燥。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是含有醛基的琼脂糖凝胶Sepharose 4B的制备过程是：将琼脂糖凝胶Sepharose 4B用蒸馏水洗净，加入1/5琼脂糖凝胶Sepharose 4B体积的新配制的0.2M的NaIO4，室温搅拌反应5小时，反应后的凝胶用蒸馏水洗净。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征是透明质酸与琼脂糖凝胶Sepharose 4B连接物的制备：将冷冻干燥后的透明质酸-己二酸二酰肼衍生物加入双蒸水中溶解，溶解后倒入5倍体积的含有醛基的琼脂糖凝胶Sepharose 4B中，室温搅拌12-16个小时，按1毫克/毫升琼脂糖凝胶Sepharose 4B体积慢慢加入硼氢化钠粉末，继续搅拌2小时后，用双蒸水洗净。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于双蒸水透析过程为透析4次，每次1升双蒸水透析18小时。
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