[发明专利]壳聚糖固定化乙酰胆碱酯酶电化学生物传感器及应用

权利要求书

1.一种壳聚糖固定化乙酰胆碱酯酶电化学生物传感器的制备方法， 其特征在于通过下列步骤制备：

(1)、玻碳电极经过抛光、在pH值为7.40的磷酸盐缓冲液中循环伏 安扫描10圈电化学活化进行预处理；

(2)、将步骤(1)经预处理过的玻碳电极与铂电极组成两电极系统 进行电沉积2小时，形成亮蓝色的带有大量负电荷的碳纳米 管的电沉积层；

(3)、将步骤(2)中经过电沉积后的玻碳电极浸入到用2mol/L的 醋酸溶液分散，并且用氢氧化钠调节pH值为5.0的0.5％的 壳聚糖溶液中，进行壳聚糖的静电自组装，15min后取出用 去离子水仔细冲洗2min，再浸入到pH值为9.18的四硼酸钠 溶液作为分散剂的碳纳米管的分散液中，进行碳纳米管的静 电自组装，其中碳纳米管的浓度为1mg·mL^-1，15min后取出， 用去离子水小心冲洗2min，至此，碳纳米管修饰层为1层， 反复操作，直到碳纳米管的修饰层层数为5，最后，将得到的 最外层为多壁碳纳米管的电极在红外灯下烘干；

(4)、继续将步骤(3)中所得的电极浸入到用2mol/L的醋酸溶液 分散，并且用氢氧化钠调节pH值为5.0的0.5％的壳聚糖溶液中， 进行壳聚糖的静电自组装，15min后取出用去离子水仔细冲洗2min， 除去多余的壳聚糖，再浸入用pH值为7.4的PBS即磷酸盐缓冲溶液 配制的100U乙酰胆碱酯酶溶液中15min后取出，用去离子水仔细 冲洗电极表面2min，至此完成一层的乙酰胆碱酯酶的组装，如此交 替浸泡冲洗，直到乙酰胆碱酯酶的修饰层数为4，便得到壳聚糖固定 化乙酰胆碱酯酶电化学生物传感器。

2.如权利要求1所述壳聚糖固定化乙酰胆碱酯酶电化学生物传感器 的制备方法，

其特征在于所述传感器可用于有机磷和氨基甲酸酯类农药的检 测。