[发明专利]银杏内生真菌菌株发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离的化合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种化合物，特别是一种银杏内生真菌菌株Chaetomiumglobosum发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离到的化合物，该化合物为一个新的化合物，虾卵brine shrimp致死生测显示非常高细胞毒活性。

背景技术

癌症一直是不能攻克的世界难题，从天然产物中寻找抗癌活性成分是解决这个世界难题的有效途径之一。

银杏是最古老的高等植物之一，是我国的特有植物，因为其所富含的各种活性成分，尤其是黄酮类化合物而被作为传统的中药以及开发成现代保健品。根据“基因水平传递假设”以及“共生理论”，与银杏共生的内生真菌可能会产生与银杏相同或者类似的化学成分。98株银杏内生真菌化学成分的初探结果显示部分内生真菌具有和银杏相同和相似的化学成分，如三萜和黄酮类化合物，内生菌Chaetomium globosum发酵物的系统预试也显示其能产生三萜黄酮类和生物碱类物质，而多数这些物质都是生理活性物质，例如抗癌活性。因此对菌株Chaetomium globosum进行了次生代谢化学成分研究，为从银杏内生菌中寻找抗癌活性物质提供科学依据。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种银杏内生真菌菌株Chaetomium globosum发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离的新化合物，该化合物具有抗癌活性，可作为制备抗癌药物被应用。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种银杏内生真菌菌株Chaetomium globosum发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离的化合物，特征在于，其结构式为：

该化合物的名称为chaetomugilin D，分子式为C₂₃H₂₇O₆Cl，分子量为435。

经申请人所进行的鉴定以及生物活性试验证明，该化合物对虾卵brineshrimp有很高的细胞毒活性，能够用于制备抗癌药物的应用。

附图说明

图1是Chaetomium globosum发酵液的乙酸乙酯萃取物化学成分提取分离流程图；

图2是标题化合物chaetomugilin D的关键HMBC和¹H-¹H COSY特征关系；

图3-图12是标题化合物的结构鉴定图，其中：

图3是标题化合物¹H NMR，图4是标题化合物¹³C NMR，图5和图6是标题化合物HMBC；图7是标题化合物H-H COSY；图8是标题化合物HMQC，图9是标题化合物HSQC；图10、11，12是标题化合物HMBC。

以下结合附图对本发明作进一步的详细描述。

具体实施方式

本发明为一种银杏内生真菌菌株Chaetomium globosum发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到具有抗癌活性的新化合物，寄主植物银杏(Ginkgobiloba)，来源于山东省临沂市。虾卵致死试验是在德国哥廷根大学完成。上述材料均为公开的生物材料。

分离鉴定菌种以及扩大发酵所用的培养基配方分别为：

PDA培养基，用于培养和分离纯化真菌，其配方为：马铃薯汁1000ml，葡萄糖20g，琼脂20g，灭菌30min。

改良培养基，用于扩大液体发酵，其配方为：CaCl₂：0.5g，KH₂PO₄：0.1g，KCl：0.05g，MgSO₄·7H₂O：0.1g，蔗糖：20.0g，蛋白胨：15.0g，1000ml的H₂O，pH为6.0。

马铃薯汁的制备方法是，土豆去皮，切片，称200g放如入1000ml自来水中煮沸30min，双层纱布过滤，滤液补水至1000ml。

主要利用的试剂为：

石油醚(60-90℃)，二氯甲烷，环己烷，丙酮，甲醇等，均为分析纯。

银杏内生真菌菌株Chaetomium globosum发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离的化合物，其分离过程如下：

1.菌种的发酵和发酵液的浓缩